目的：探究膀胱肿瘤T24/MMC细胞株模型建立的方法，检测耐药细胞株的多药耐药性，并验证多药耐药基因（Multidrugresistancegene1MDR1）的表达。方法：通过短时间、大剂量丝裂霉素C（MitomycinCMMC）冲击给药诱导法建立T24/MMC多药耐药细胞系，MTT法测定T24/MMC耐药细胞株及亲本细胞T24的生长曲线，以亲本T24细胞作为对照，MTT比色法检测T24/MMC细胞对多种膀胱肿瘤化疗药物的敏感性,荧光定量PCR验证MDR-1基因的表达变化。实验数据处理采用SPSS17.0统计软件分析，P<0.05为有统计学意义。结果：1.通过3次大剂量MMC1小时成功诱导出T24/MMC耐药细胞株。2.亲本细胞T24细胞株与T24/MMC耐药细胞株生长趋势经过方差分析其中24h的测定结果有显著差异（P＜0.05），48h及72h无显著差异（P＞0.05）。3.T24/MMC细胞对MMC耐药性明显升高，RI为12，环磷酰胺（CTX）对T24/MMC细胞的RI为3.24，T24/MMC对环磷酰胺产生明显耐药性，P＜0.05。表柔比星（EPB）对T24/MMC的RI为3.61，T24/MMC对表柔比星产生明显耐药性，P＜0.05。4.荧光定量PCR检测T24/MMC细胞株的MDR1基因的相对表达量较亲本细胞T24明显升高，T24/MMC细胞中MDR1的表达量约是T24细胞中的15.12倍，经独立样本t检验，P＜0.05,有统计学意义。结论：1.本实验通过3次大剂量MMC1小时能成功诱导出T24/MMC耐药细胞株，。2.T24/MMC耐药细胞株不仅对MMC耐受，而且对从未接触过的环磷酰胺及表柔比星产生耐药，证明诱导出的T24/MMC耐药细胞株具有多药耐药性。3.通过荧光定量PCR方法检测出T24/MMC耐药细胞株中MDR1基因的表达明显高于亲本细胞株T24，说明MDR1基因的高表达通过降低细胞内药物浓度使细胞耐药，是T24/MMC产生耐药的分子基础。