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目的:磷酸肌酸(Phosphocreatine,PCr)是一种外源性能量物质,最近报道PCr对氧化因子和炎症因子引起的内皮细胞损伤具有保护作用。然而,PCr预处理对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的单核巨噬细胞(RAW264.7)的影响未见报道。本研究目的探讨PCr对LPS诱导的RAW264.7炎症反应是否具有保护作用、抑制炎症的可能性并探讨可能的初步机制。方法:首先,用LPS刺激小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞。采用MTT法,观察并选取PCr对RAW264.7无细胞毒性的适宜浓度;NO检测法优化LPS对RAW264.7细胞诱导的最佳浓度;实验组中加入梯度浓度5.0、10.0和20.0mmol·L-11 PCr 12h后,加入1.0mg·L-1 LPS,对照组单纯加入1.0mg·L-1的LPS,空白组仅加入等体积的PBS。应用流式细胞仪观察RAW264.7的ROS表达;采用Real-time PCR方法检测5.0、10.0和20.0mmol·L-1 PCr与细胞培养后炎性相关标志性基因TNF-α、IL-6表达水平;采用Western blot方法检测炎症相关蛋白p-p65和COX2的表达;利用DAPI染色和免疫荧光染色法观察RAW264.7细胞中的p65的表达。结果:MMT结果显示,PCr在0.220 mmol·L-1的处理条件下,对RAW264.7细胞无细胞毒性;NO硝酸还原法检测实验结果示,当LPS浓度大于1.0 mg·L-1时,LPS对RAW264.7细胞NO的释放与空白组相比有显著上调(P﹤0.01),故正式实验选取LPS浓度为1.0mg·L-1诱导RAW264.7细胞;而当PCr预处理浓度为10.0和15.0 mmol·L-1时,NO释放量呈剂量依赖性减少,与单纯LPS对照组相比有显著差异(P﹤0.01);通过5.0、10.0和20.0mmol·L-1浓度PCr预处理可抑制过量的ROS产生,LPS+PCr组与单纯LPS对照组相比,ROS产生量有显著差异(P﹤0.01);当实验组PCr浓度为10和20 mmol·L-1时,TNF-α表达显著减少(P﹤0.01),当PCr浓度为20 mmol·L-1时,IL-6的表达也显著减少(P﹤0.01);Western blot结果示,与单纯LPS组相比,LPS+PCr组中p-p65和COX2表达显著减少(P﹤0.01);免疫荧光结果示LPS+PCr组可见细胞核内的p65表达量明显降低。结论:PCr可以通过NF-κB途径,抑制LPS诱导的单核巨噬细胞RAW264.7炎症反应,未来其在如牙周炎、骨关节炎等炎症性病损中,发挥抗炎症治疗作用具有潜在可能性。