1.奥利亚罗非鱼(♀)×鳜鱼(♂)杂交的受精生物学研究 通过对奥利亚罗非鱼(♀)和鳜鱼(♂)杂交的受精细胞学观察发现:异源精子入卵后产生星光,并核化成雄性原核,与雌原核互相靠近,接触最终完全融合为一个合子核,合子核继续发育。这表明奥利亚罗非鱼和鳜鱼虽属不同科间的远缘杂交,但有正常的受精细胞学程序和常规的细胞分裂(卵裂)方式。分析比较了奥利亚罗非鱼,鳜鱼以及奥鳜杂种胚胎发育情况,发现杂种胚胎的发育速度在囊胚早期与母本奥利亚罗非鱼基本一致,到囊胚后期速度有所减慢,但与鳜鱼胚胎发育速度相差很大。 2.罗非鱼外周血淋巴细胞培养及染色体制各条件探索 从罗非鱼侧线鳞处尾静脉采血,采用RPM11640全培养基进行体外淋巴细胞培养。通过对采血后细胞培养时间、秋水仙素浓度及加入时间、低渗时间及温度等条件的摸索,建立了较成熟的培养鱼类血淋巴细胞的实验方法。实验结果表明:全血细胞在CO2培养箱30℃培养72-96h,培养终止前2-3h加入0.05ug/ml左右浓度的秋水仙素,低渗35min后固定、滴片及染色,可以制备出分裂相较好的染色体玻片;且全血在4℃保存10d仍可以制备出优质染色体玻片。 3.奥利亚罗非鱼(♀)×鳜鱼(♂)及其双亲的染色体核型分析 采用人工授精法以奥利亚罗非鱼为母本,鳜鱼为父本,获得了能正常发育的后代,现利用微量全血培养法对奥利亚罗非鱼、鳜鱼及后代鱼的染色体数目和核型进行了研究。试验结果表明:奥利亚罗非鱼染色体数目为2n=44,核型公式为:6sm+24st+14t,NF=50;鳜鱼为2n=48,核型公式为:8sm+4st+36t,NF=56;后代鱼为2n=44,核型公式为:6sm+26st+12t,NF=50。经对比分析,奥利亚罗非鱼与后代鱼的核型差异不显著。