苜蓿(紫花、黄花)再生体系的建立及遗传转化

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Melanzpl1
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本论文以5个黄花苜蓿,1个紫花苜蓿品种为材料,通过研究不同外植体和不同外源激素组合的培养基对愈伤组织诱导、体胚分化率的影响,以及各外植体对Hyg、Km的敏感性,以期建立高频、快繁、稳定的苜蓿(紫花、黄花)再生体系和高效的农杆菌介导的转化体系,为获得低木质素和高含硫氨基酸的转基因苜蓿提供技术支持和理论依据。主要试验结果如下:   (1)本实验中对4个黄花苜蓿品种kayak、05342、05172、00024子叶、下胚轴愈伤诱导情况研究,发现前3种为高愈伤诱导率品种,在愈伤诱导培养基UM+2mg/L2,4-D+0.25mg/L KT的诱导率为80%-100%;kayak下胚轴愈伤组织在0.8%MS分化培养基,05172下胚轴、子叶愈伤在诱导培养基上继代,2个月后均可分化出胚状体,胚状体分化率分别为10%、23%和55%。   (2)紫花苜蓿中苜1号子叶与下胚轴在UM+2mg/L2,4-D+0.25mg/L KT培养基上,愈伤诱导率可达100%,且继代培养1个月后愈伤组织表面出现原始胚状体,分化率分别为30%和50%。将子叶愈伤组织继续在光照下继代,分化率可达80-90%;待胚状体成熟,移入1/2MS生根培养基上,3-4周可以形成完整植株。   (3)细胞分裂素K-T的浓度对愈伤的诱导有一定影响,随着KT浓度升高,愈伤诱导率增加,但过高又影响愈伤的颜色、质地等,不利芽或胚状体的分化。且生长素2,4-D和KT的组合更有利愈伤的形成。   (4)中苜1号和小花子叶、下胚轴最佳Km选择压分别为75mg/L、100mg/L。   (5)将载体pDESAK-APR(含过表达甲硫氨酸合成相关的基因AK、APR)和载体p449hct-c3h(含干扰木质素合成相关基因HCT、C3H基因)转化到农杆菌LBA4404,以中苜1号为受体材料进行了初步转化。
其他文献
朱潭山位于浙江省丽水市缙云县境内,远远望去,呈现眼前的是一片从未见过的神仙境地:一条小河由北向南缓缓流动,神情怡然,静谧安详。稀奇的是整个水面雾气蒸腾,丝丝缕缕都在浮
近年来,随着个人数据通信的发展,功能强大的便携式数据终端和多媒体终端得到了广泛的应用。为了实现用户在任何时间、任何地点均能实现数据通信的目标,要求传统的计算机网络由有
很多人把85度C的收缩解释为管理问题,其实,他们看到的只是表面。  三十年河东,三十年河西。85度C进入大陆的几年时间,很好地印证了这句话。  2007年,85度C进入大陆市场, 2012年,我看到漫天的新闻,说85度C已经快要超越星巴克,一时之间,似乎看到了一个国际性品牌的崛起。2016年,情况逆转。随着郑州最后一家店面的关闭,曾经宣称一年内在要河南开10~12家店面的85度C在当地已经没有了踪
本研究以喜树为研究对象,通过对内生放线菌分离方法的改进,得到一批喜树内生放线菌资源,通过16SrRNA基因序列分析,初步揭示了内生放线菌的物利组成以及其在喜树内的分布规律,并对
烟曲霉是一种常见的致病真菌,会产生大量漂浮于空气中的分生孢子,很容易在免疫功能低下的人群中引发致命的侵袭性曲霉病。针对烟曲霉细胞壁的药物治疗往往由于细胞壁补偿机制
生物是一门以实验为基础的学科。教学中要帮助学生形成生物学概念,获得生物知识和实验技能,培养观察和实践能力,培养实事求是、严肃认真的科学态度和科学方法。在教学中,教师通过
近年来,我国种植业和畜禽养殖业排放的非点源污染物造成的水环境问题日渐突出。河岸植被缓冲带作为连接陆地生态系统和水生生态系统的过渡带,具有阻滞和截获非点源污染物、减少
基因芯片技术能够获取全基因组表达的大规模数据,但很难利用手工方法筛选出数据中包含的有效信息以及关联不同生物学层面的数据。本文所开发的基因表达热点信息可视化工具是一
In the past 18 months,China’s stock market staged a soul-stirring and exciting drama.The ups and downs of the index seemed to be the only important number in p
随着医疗技术的发展和进步,各种消化内镜在临床上的应用越来越广泛,为疾病的诊治与预防起到了积极的作用.但是作为一种侵入性的诊疗方法,通过内镜传播感染的可能,也越来越引