目的:探讨蒽醌大黄酸、大黄素甲醚和二乙酰大黄酸对人胰腺导管腺癌的抗肿瘤作用及表观遗传学效应。方法:在生物信息学研究中,采用中位生存率分析来评估胰腺癌患者中位生存率与靶基因表达的相关性,并推断蒽醌改变靶基因表达对生存率的影响。这一步骤是通过Kaplan-Meier绘图仪（KMP）从在线数据库中检索177例胰腺癌患者的临床资料来完成的。最后,进行网络药理学和靶向预测分析,确定大黄活性成分和二乙酰大黄酸可能作用于抑制胰腺癌的潜在靶点。采用高、中、低剂量的每种药物（大黄酸/二乙酰大黄酸:80μM、40μM、20μM、大黄素甲醚:8μM、4μM和2μM）体外评价大黄酸、大黄素甲醚和二乙酰大黄酸的疗效。MTT法测定人胰腺导管腺癌细胞株SW1990和Capan-2在24、48和72小时内的细胞存活率和毒性。用RT-q PCR法检测SW1990中靶基因24和48小时的基因表达。靶基因是1)先前报道在胰腺癌中甲基化的肿瘤抑制基因:RASSF1A、CDKN2A、TUSC3、STK11、CDH13;2)癌基因:KRAS;3)泛素特异性蛋白酶:USP21;4)调节性甲基化基因:DNMT1和TET1。此外,根据RT-q PCR结果,用甲基化特异性PCR（MSP）检测大黄酸治疗24小时和大黄素甲醚治疗48小时后抑癌基因甲基化和非甲基化的百分率。结果:中位生存预测显示KRAS基因表达的下降和TUSC3基因表达的增加与胰腺癌患者生存期的增加呈正相关。网络药理学分析阐明了从更广泛的角度分析,大黄及其有效成分和二乙酰大黄酸可通过催乳素信号途径、VEGF信号途径、HIF-1信号途径、Erb B信号途径等途径抑制胰腺癌。更重要的是,大黄酸可能通过p53信号途径靶向,因为该途径的富集倍数更大,类似地,二乙酰大黄酸可能通过过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARs）信号途径起作用,而大黄素甲醚可能通过催乳素信号途径起作用。大黄酸和二乙酰大黄酸对SW1990和Capan-2细胞的增殖具有剂量和时间依赖性。大黄素甲醚以时间依赖的方式抑制这些细胞系的增殖。此外,3种蒽醌在SW1990中调节了目标基因的表达。大黄酸在24小时、二乙酰大黄酸48小时和大黄素甲醚48小时对基因表达调控结果相对较好。大黄酸降低了KRAS、USP21和DNMT1的基因表达,增加了CDH13、STK11、RASSF1A和TUSC3的基因表达,但没有增加TET1的基因表达。二乙酰大黄酸降低了KRAS、USP21的基因表达,增加了RASSF1A和CDKN2A的基因表达,并略微增加了TET1（低剂量）和STK11的基因表达,但没有增加CDH13的基因表达。大黄素甲醚降低KRAS、USP21和DNMT1的基因表达,增加CDH13、RASSF1A、CDKN2A、TUSC3和TET1的基因表达,但不增加STK11的基因表达。对于MSP,用大黄酸处理SW1990细胞24小时,使所有靶肿瘤抑制基因RASSF1A、STK11、CDKN2A、TUSC3和CDH13去甲基化,而大黄素甲醚处理细胞48小时,可以使除STK11以外的所有靶肿瘤抑制基因去甲基化。这些结果与RT q PCR结果一致。中位生存预测显示RASSF1和TUSC3基因表达的增加与胰腺癌患者生存率的增加呈正相关。结论:1.KRAS低表达和TUSC3高表达都与生存期延长有关。2.大黄和大黄素甲醚可能通过催乳素信号通路,而大黄酸和二乙酰大黄酸可能分别通过p53和PPAR信号通路作用于胰腺癌。3.大黄酸、大黄素甲醚和二乙酰大黄酸可以抑制SW1990和CAPAN-2的体外增殖,并调节靶基因RASSF1A、TUSC3、STK11、CDH13、CDKN2A、KRAS、USP21、DNMT1和TET1。大黄酸可使RASSF1A、TUSC3、STK11、CDH13、CDKN2A去甲基化,大黄素甲醚可使除STK11以外的上述肿瘤抑制基因去甲基化。由于大黄酸、大黄素甲醚和二乙酰大黄酸可能是治疗胰腺癌的有希望的药物,因此有必要进一步研究以确定其在临床上的疗效。