【摘 要】
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目的和意义白血病常伴有髓外浸润的发生,髓外浸润尤其是中枢神经系统(Central nervous system leukemia, CNSL)的浸润在治疗中是一个难点,是白血病复发的一个来源,在对中枢神
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目的和意义白血病常伴有髓外浸润的发生,髓外浸润尤其是中枢神经系统(Central nervous system leukemia, CNSL)的浸润在治疗中是一个难点,是白血病复发的一个来源,在对中枢神经系统白血病及髓外浸润的研究中因缺乏一个良好有效的模型而难以对其机制进行深入研究。对实体肿瘤研究发现多种因素参与了肿瘤的浸润及转移,如基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制剂即组织型基质金属蛋白酶抑制剂(TIMPs),细胞表面基质金属蛋白酶诱导因子(Emmprin,CD147),基质细胞衍生因子1及其特异性受体(SDF-1/CXCR4)等。这些因素是否在白血病细胞髓外浸润中起着一定作用?本实验室前期研究发现高表达MMP-2与白血病的髓外浸润相关,本研究将通过建立人白血病裸鼠中枢神经系统白血病及多器官浸润模型,探讨TIMP-2基因在CNSL及髓外浸润中的作用;并建立体外共培养模型,对白血病细胞体外侵袭相关的因素进行研究,提出白血病髓外浸润的部分机制。方法第一部分对4和6周龄的BALB/c裸鼠进行切脾(splenectomy),环磷酰胺腹腔注射(cytoxan intraperitoneal injection)及全身亚致死剂量辐照(sublethal irradiation)等预处理(SCI预处理),经尾静脉接种1×10~7个人单核细胞白血病细胞系SHI-1细胞。4周龄的裸鼠接种后每周处死一只直至出现裸鼠发病死亡,6周龄者接种后30天随机处死6只检测,其余裸鼠在濒死前或死亡后即行解剖。RT-PCR方法检测裸鼠各脏器中SHI-1细胞MLL/AF6 mRNA表达;各脏器包括头颅及脊椎常规病理切片,观察异常白血病细胞在各脏器中的浸润情况,对白血病细胞在裸鼠头颅内的浸润程度进行分级;抗人CD45抗体对病理切片进行免疫组化染色;流式细胞仪(FCM)检测裸鼠股骨
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