【摘 要】
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甘薯富含多种营养成分,其中甘薯多糖为甘薯的活性成分之一,研究表明甘薯活性多糖具有抗氧化、抗肿瘤、增强免疫及降血糖血脂等功能。本论文从甘薯多糖的提取纯化、结构特征及对小鼠结肠炎的预防作用进行研究,主要结果如下:以甘薯多糖的提取率为指标,用响应面分析法对甘薯多糖的提取工艺进行优化。结果表明,最佳提取温度为61℃、时间3 h、料液比1:20、提取次数3次。用苯酚-硫酸法测得实际的多糖提取率为12.65%
【基金项目】
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十三五重点研发计划项目（2016YFNC010104）；
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甘薯富含多种营养成分,其中甘薯多糖为甘薯的活性成分之一,研究表明甘薯活性多糖具有抗氧化、抗肿瘤、增强免疫及降血糖血脂等功能。本论文从甘薯多糖的提取纯化、结构特征及对小鼠结肠炎的预防作用进行研究,主要结果如下:以甘薯多糖的提取率为指标,用响应面分析法对甘薯多糖的提取工艺进行优化。结果表明,最佳提取温度为61℃、时间3 h、料液比1:20、提取次数3次。用苯酚-硫酸法测得实际的多糖提取率为12.65%。经水提、醇沉、AB-8大孔吸附树脂脱色、脱蛋白、透析等操作,冻干之后得到粗多糖组分。利用Sephadex G200对粗多糖进行纯化,得到RSPP-A,经HPLC测定RSPP-A的分子量为2.51×10~6KDa,紫外扫描图谱显示RSPP-A基本不含游离或结合的蛋白质、核酸类物质。苯酚-硫酸法测得糖含量为67.42%,硫酸-咔唑法测得糖醛酸含量为31.23%,考马斯亮蓝法测得蛋白含量为0.35%。显色实验证实RSPP-A是不含有还原性羰基和酚羟基的非淀粉类多糖。红外光谱分析表明该多糖是吡喃环结构。离子色谱法测得单糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸,其摩尔比为1.00:2.00:3.67:1.21:1.17:1.14。高碘酸氧化和Smith降解结果表明含有1→3、1→4、1→4,6连接的糖苷键。甲基化分析表明PSPP-A是由→6)Glcp（1→;→4）Araf（1→;→6）Galp（1→;→4）Rhap（3→;→3,6）Galp(1→;Glcp（1→组成。二维核磁结果表明RSPP-A是由→4）α-L-Araf（1→;→4）α-L-Rhap（3→;→6）α-D-Galp（1→;→3,6）α-D-Galp（1→;→6）α-D-Glcp(1→;α-D-Glcp(1→组成。扫描电镜分析表明,RSPP-A呈现条状。利用DSS诱导建立小鼠结肠炎模型,研究RSPP-A对小鼠结肠炎的影响。结果表明,多糖处理组小鼠体重较模型组均有不同程度的改善,说明RSPP-A能减少对DSS诱导的小鼠体重变化;与DSS组相比,多糖组结肠长度显著增加,说明RSPP-A对DSS诱导的结肠炎有一定的预防作用;RSPP-A还可以通过降低脾脏系数,增加胸腺指数从而减轻炎症的发生;DAI评分和HE染色结果表明RSPP-A能够缓解DSS诱导的小鼠结肠炎损伤情况;短链脂肪酸测定结果显示RSPP-A可以提高DSS诱导小鼠的SCFAs水平。Western Blot结果显示,RSPP-A可通过调节MAPK信号通路中关键蛋白MEK、ERK1/2、及下游FOXO3和NF-ΚB p50蛋白的表达,改善小鼠结肠炎损伤。因此,通过本实验研究表明,甘薯多糖RSPP-A在一定程度上能起到预防结肠炎的作用。
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