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安徽虫瘟霉(Zoophthora anhuiensis)是仅见于我国的蚜虫专化性病原真菌,属于虫霉目(Entomophthorales)的虫霉科(Entomophthoraceae)。安徽虫瘟霉常在秋冬季引发长江中下游地区菜蚜种群的流行病。寄主专化性虫霉一般对营养条件要求比较苛刻,其侵染体的繁殖相当困难,阻碍着虫霉作为害虫生防真菌资源的利用研究。安徽虫瘟霉虽可分离培养,但同其它寄主专化性虫霉一样,其侵染体很难大量繁殖。针对这一技术难题,本研究尝试建立了安徽虫瘟霉侵染体的黍米培养技术体系,并对培养物进行了产孢潜能、杀蚜活性评价以及贮存条件的摸索。主要研究结果概述如下: 黍米培养物及产孢潜能 采用俗称黄米的黍米(Panicum miliaceum)作为营养基质,对安徽虫瘟霉ZU1102菌株进行直接固体培养。将SEMA平板培养的半个菌落挑碎,移入3mL萨氏培养液中振荡混匀,再倒入干重15g、经灭菌后适度熟化、含水量为45%的黍米中,充分混匀后瓶口加盖可透气瓶塞,在20℃和12L∶12D的温光条件下静止固体培养15天,从第3天起隔天从中取样,采用自行设计的采孢装置精确定量测定米粒的产孢潜能。黍米培养物的产孢潜能因培养天数不同而异,以培养7天的产孢量最大,达到13.0×104个孢子/粒,产孢持续时间长达6天。相对于新鲜的病死成蚜2.5×104个孢子/头的产孢量和仅60小时的有效产孢时间,培养5~11天的黍米培养物的产孢潜能高出4.2~5.3倍,持续产孢时间延长2倍以上。结果表明,安徽虫瘟霉黍米培养物的产孢性状与该菌侵染致死的蚜尸相同,单颗米粒培养物相当于天然蚜尸的模拟物,但产孢潜能和持续产孢时间远优于天然蚜尸。 黍米培养物的侵染性及毒力 用培养7天的安徽虫瘟霉黍米培养物作为侵染源对桃蚜(Myzus persicae)2~3龄若蚜进行7.9~134.9个孢子/mm2共9个剂量的孢子浴接种,所获数据很好地拟合了时间-剂量-死亡率模型。接种后第5~7天的LC50依次为59.8、39.5和33.5个孢子/mm2,LC90依次为354、234和198个孢子/mm2。在57.7~134.9个孢子/mm2的接种剂量范围内,致死中时LT50从5.1天下降到4.3天。结果表明,安徽虫瘟霉的黍米培养物具有菌种对寄主固有的侵染性和毒力。 黍米培养物的贮存 虫霉培养物保存的难度较大。安徽虫瘟霉黍米培养物能否在常规条件下贮存,是黍米培养技术的重要环节。将培养7天的安徽虫瘟霉黍米培养物分装到100mL小烧杯中,分别进行报纸封口(处理1)、保鲜膜封口(处理2)和加变色硅胶