重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的实验研究

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第一部分 重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的动物模型制作 目的 建立简便、易复制、重复性好的重症急性胰腺炎(SAP)并发急性肺损伤(ALI)动物模型。方法30只雄性SD大鼠随机分为五组:假手术组(SO组)、SAP组后1h、4h、8h、12h组。以0.1ml/min匀速逆行胰胆管注入5%牛磺胆酸钠(0.1ml/kg)建立SAP并发ALI大鼠模型。牛磺胆酸钠注射后1h、4h、8h、12h检测大鼠腹水量、血淀粉酶、血气分析、肺湿干重比以及胰腺和肺组织病理学改变。结果随着时间的延长,SAP组腹水量逐渐增加,血淀粉酶逐渐升高。各时相点所有动物的胰腺组织均存在不同程度的间质水肿、炎细胞浸润、胰腺组织灶性或片状出血坏死,胰腺及周围组织出现脂肪坏死及皂化斑,并伴血性腹水,呈典型的SAP病理改变。同时肺组织在各时相点形态上出现了不同程度的炎细胞浸润及肺间质、肺泡水肿、出血、灶性或大片肺不张等典型的ALI病理改变;在功能方面,随着肺损伤的加重,PaO2进行性下降,PaCO2则有逐渐升高,符合临床ALI血气特征。随着胰腺损伤的逐渐加重,肺损伤程度也逐渐加重。结论 牛磺胆酸钠诱导SAP并发ALI的大鼠模型是成功的,本模型操作方法简单,重复性好。 第二部分 重症急性胰腺炎并发急性肺损伤机制的实验研究 目的 探讨牛磺胆酸钠诱导的大鼠SAP并发ALI的发病机制。方法30只雄性SD大鼠随机分为五组:SO组、SAP组后1h、4h、8h、12h组。逆行性胰胆管注射5%牛磺胆酸钠建立SAP并发ALI大鼠模型。牛磺胆酸钠注射后1h、4h、8h、12h电泳迁移率改变法(EMSA)检测肺组织匀浆细胞核提取物中NF-кB的表达;Western blot法检测ICAM-1的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清TNF-α、IL-1β的浓度;RT-PCR检测肺组织匀浆中TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达;检测肺组织匀浆中MPO水平;观察肺组织病理学改变。结果SAP组术后1h肺组织匀浆NF-кB活性开始升高,血清中TNF-α在1h
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