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本试验采用FSH、PMSG、LH、hCG四种激素的不同组合对家兔进行超数排卵,并对超数排卵所采集到的8-细胞、桑椹胚、早期囊胚分别进行徒手分割和显微分割,分割后的半胚在三种不同的培养液(含20%小牛血清的mPBS、DMEM、TCM-199)于37.5°C、5%CO2饱和湿度的培养箱中培养。试验结果如下:1 FSH + hCG组合中的60单位FSH + 75单位hCG组合效果最佳:排卵点、平均回收胚胎数、平均可用胚胎数分别为33.0±4.60、27.92±4.46、21.75±4.33,均显著高于40单位和80单位FSH处理组(P<0.05)。2不同激素的对比试验中,FSH+ hCG组合的平均回收胚胎数和平均可用胚胎数(27.92±4.46、21.75±4.33)显著高于(P<0.05) FSH+LH (23.20±3.88、17.9±2.69)与PMSG + hCG组合(22.38±4.50、17.25±4.33),排卵点差异不显著(P>0.05)。3比较三种不同时期胚胎的分割效果及其半胚在三种不同的培养液(含20%小牛血清的mPBS、TCM-199、DMEM)中的发育情况。结果表明:早期囊胚分割成功率高于8-细胞胚胎分割成功率(82.18% vs 73.40%),经检验差异显著(P<0.05),早期囊胚与桑椹胚分割成功率差异不显著(P>0.05),桑椹胚与8-细胞胚胎分割成功率差异也不显著(P>0.05)。8-细胞、桑椹胚、早期囊胚经分割后半胚体外培养发育至囊胚的比率三者依次增加(34.78% vs 57.17% vs 61.44%),经检验8-细胞与桑椹胚、囊胚均差异显著(P<0.05),桑椹胚与早期囊胚之间差异不显著(P>0.05);8-细胞、桑椹胚、早期囊胚半胚在三种培养液中的发育状况均为DMEM优于TCM-199和mPBS,TCM-199优于mPBS,除8-细胞胚胎在mPBS中的发育至囊胚的比率与TCM-199差异不显著(P>0.05),其余差异均显著(P<0.05)。4将不同时期分割的半胚置于相同的培养液中:TCM-199培养液中8-细胞分割后的半胚发育至囊胚的比率显著低于桑椹胚、早期囊胚分割后半胚发育至囊胚的比率(分别为22.22% vs 57.38% vs 67.86%, P<0.05);桑椹胚与早期囊胚半胚发育至囊胚的比率差异不显著;DMEM培养液中8-细胞分割后的半胚发育至囊胚的比率显著低于桑椹胚、早期囊胚分割后半胚发育至囊胚的比率(分别为58.33% vs 74.65% vs 85.29%, P<0.05);桑椹胚与早期囊胚差异不显著(P>0.05)。5本试验比较了去除粘蛋白层对胚胎分割的影响,结果表明:桑椹胚、早期囊胚去除粘蛋白层组(+)在分割成功率上显著高于未去除粘白层组(-)(分别为93.24% vs 80.68%; 92.40% vs 80.95%),经检验差异均显著(P<0.05),但是半胚发育至囊胚的比率与未处理组(-)相比差异均不显著(分别为71.01% vs 74.65%; 78.82% vs 85.29%, P>0.05)。6不同分割液对未去除粘蛋白层桑椹胚、早期囊胚分割效果的影响,结果表明桑椹胚、早期囊胚在0.125M浓度的蔗糖液中分割,其分割成功率均略低于在0.25M浓度的蔗糖液中分割,但桑椹胚、早期囊胚半胚发育至囊胚的比率两者差异不显著(P>0.05)。7利用显微分割和徒手分割的方法对去除粘蛋白层的桑椹胚进行分割,徒手分割的分割成功率略低于显微分割(93.24% vs 97.62%),经检验差异不显著(P>0.05)。发育至囊胚的比率徒手分割低于显微分割(71.01% vs 85.37%),经检验两者差异显著(P<0.05)。