EGFL7表达水平与颈动脉斑块新生血管生成及易损程度的相关性研究

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目的:通过运用HE染色、油红O染色、Masson染色的方法,在人颈动脉粥样硬化斑块标本中,对动脉硬化斑块内的脂质成分、平滑肌成分、巨噬细胞成分和胶原纤维成分分别进行染色,用免疫组织化学染色的方法对颈动脉硬化斑块内微血管密度进行测算、计数,同时用免疫组织化学染色的方法测定人颈动脉粥样硬化斑块内类表皮生长因子样结构域7(Epidermal Growth Factor like domain7,EGFL7)蛋白在人颈动脉粥样硬化斑块中内皮细胞的表达情况,探究EGFL7蛋白表达水平与人颈动脉斑块内微血管生成情况的关系、EGFL7蛋白表达水平与人颈动脉硬化斑块稳定性之间的联系以及人颈动脉硬化斑块内微血管生成情况与动脉粥样硬化斑块稳定性之间的联系。方法:收集从2015年7月至2016年6月在青岛大学附属医院神经外科行颈动脉内膜剥脱术的患者的手术斑块共计36例,术前对全部患者行双侧颈部血管超声检查,头、颈部电子计算机断层血管造影(CTA)检查及经颅多普勒检查(TCD),其中有一例老年女性患者因伴发明显的心肌缺血症状予以排除。对于双侧颈内动脉均有明确的狭窄表现(狭窄率>50%)的患者,优先选择对症状明显如有短暂性脑缺血(TIA)发作或脑卒中发生的一侧血管(即责任血管)进行手术治疗。根据病理组织特点,分组情况为易损斑块组数量为15例(7名男性,8名女性),稳定斑块组数量为20例(10名男性,10名女性)。标本离体后随即放入10%的中性缓冲福尔马林中进行固定并保存。将标本进行常规石蜡包埋、切片、HE染色、Masson染色、油红O染色及免疫组化染色。根据AHA的对于人脉管系统血栓形成的病理组织学分类标准,在显微镜下颈动脉粥样硬化斑块组织分为稳定斑块组和易损斑块组;通过测算平均光密度(IOD)、计算表达阳性细胞所占百分比的方式探究EGFL7、CD34、CD68、α-SMC在颈动脉粥样硬化中的表达情况。结果:稳定斑块组的易损指数为(0.40±0.16),而易损斑块组易损指数为(1.97±0.63),差异有统计学意义(t=9.448,P<0.05);EGFL7在稳定斑块组阳性细胞面积均数(0.093±0.05),高于易损斑块中阳性细胞面积均数(0.213±0.41),差异有统计学意义(t=7.805,P<0.05);MVD计数值在稳定斑块组为(30.500±18.03),低于易损斑块组(127.867±40.79)差异有统计学意义(t=8.634,P<0.05);MVD计数与斑块易损指数呈正相关(r=0.690,P<0.05);EGFL7阳性细胞面积百分比与MVD存在正相关(r=0.690,P<0.05);EGFL7阳性细胞面积百分比与斑块易损指数也为正相关(r=0.873,P<0.05)。结论:1、EGFL7在内皮细胞中高表达,会促进内皮细胞功能,促进血管形成。2、CD34表达水平高,MVD值高的斑块往往伴随易损系数增高,斑块稳定性差。3、EGFL7在易损斑块中表达高,且与易损系数存在正相关关系,提示斑块内EGFL7的促血管生成功能会降低斑块稳定性。
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