蜂花粉是自然中存在的营养最丰富的的天然食品资源之一,我国油菜为我国大面积种植的农业经济作物,油菜蜂花粉源丰富,我国油菜蜂花粉的产量在300吨以上。蜂花粉营养丰富,含有大量的多糖、氨基酸、蛋白质、酚类化合物等物质,蜂花粉中酚类化合物已经成为目前研究重点之一,本文对蜂花粉中酚类化合物的测定进行了方法学研究,对酚类化合物分离柱材进行了选择,通过酸解确定了分离组分含有大量的黄酮苷类物质,并进行了体内、外抗氧化实验,为蜂花粉的功能活性研究提供了一定的参考。本实验对铁氰化钾法、Folin-phenol法、酒石酸亚铁法进行了方法学研究,通过精密度、稳定性、回收率、重复性和最大吸收波长等方法学的考察,建立了标准曲线,确定了Folin-phenol法是蜂花粉中酚类化合物含量测定的最佳方法,该法测得蜂花粉中酚类化合物的含量为2.274%。以酚类化合物含量、DPPH?抑制率和还原力为指标,考察了聚酰胺和D101大孔树脂对油菜蜂花粉中的酚类化合物分离效果。油菜蜂花粉正丁醇萃取物,经聚酰胺层析,80%和100%乙醇洗脱组分酚类化合物含量、DPPH?抑制率和还原力指标明显提高,表明聚酰胺适合分离油菜蜂花粉中极性较小的酚类化合物,而蜂花粉水溶性酚类化合物通过D101大孔树脂分离,其50%乙醇洗脱组分酚类化合物含量显著地高于其它组分,达到21.5%,且DPPH?和还原力活性较强,说明D101大孔树脂更适合蜂花粉中水溶性酚类化合物的分离。蜂花粉醇提取物通过盐酸酸解,经薄层色谱法和和高效液相法检测,生成了槲皮素和山奈酚,其DPPH自由基抑制率显著增强。薄层色谱法将样品中的黄酮苷元类物质分离,TLC-DPPH技术能对蜂花粉提取物及其酸解液中具有DPPH?清除力的物质进行直观分析,本文首次将TLC-DPPH法引入蜂花粉生物活性物质的分离和抗氧化活性研究,通过显色反应,筛选功能活性组分。以D101大孔树脂50%乙醇洗脱组分为原料,分别进行DPPH自由基清除实验和小鼠脂质过氧化模型试验,动物实验以血清中的MDA和T-AOC,肝匀浆中MDA、T-AOC和GSH为指标,结果表明,黄酮苷类物质DPPH半抑制浓度显著地低于山奈酚,说明黄酮苷类物质DPPH?抑制力低于黄酮苷元。同时,黄酮苷类化合物能够显著地降低小鼠肝匀浆MDA的生成,提高小鼠肝匀浆GSH含量,同时提高小鼠肝匀浆和血清中T-AOC,说明蜂花粉中黄酮苷类物质在体内具有较强的自由基清除率。以D101大孔树脂50%乙醇洗脱组分为原料,利用制备型高效液相色谱进行分离,得到了一种黄酮苷类物质,经过HPLC面积归一化处理,其纯度达到97.42%,质谱、核磁共振鉴定其结构是山奈酚3-O-(2”-O-β-D-吡喃葡萄糖苷基)-β-D-葡萄糖苷,在浓度为750μg/ml时,山奈酚3-O-(2”-O-β-D-吡喃葡萄糖苷基)-β-D-葡萄糖苷DPPH?抑制率为10.68%,说明黄酮苷类物质DPPH自由基清除率较低。油菜蜂花粉含有多种生物活性物质,各种生物活性物质功能活性差异较大,本文对油菜蜂花粉酚类化合物进行了分离、DPPH自由基清除力、还原力和脂质过氧化模型小鼠实验,其它功能活性物质有待进一步研究。