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目的本课题主要是对蜜柑草(PhyllanthusmatsumuraeHayata)进行植物分类学研究、药材性状特征研究,显微特征研究、理化鉴别研究,有效成分的含量测定研究等,建立蜜柑草的质量标准。对进一步开发利用我国及我省叶下珠属植物资源提供科学依据。
方法在查阅古今文献资料的基础上,进行文献学研究,写出综述论文。(1)进行实地调查,采集不同季节标本,对根、茎、叶、花、果实、种子、用放大镜及体视镜进行观察并描述其特征,研究蜜柑草的植物形态。(2)对样品外观特征进行测量,观察表面的特征,在体视镜下观察根、茎、叶、花、果实、种子表面、横断面的特征并描述,对蜜柑草的性状进行鉴定。(3)显微鉴定采用用徒手切片、石蜡切片、粉末装片的方法。(4)采用紫外光谱法对蜜柑草进行理化鉴定。具体方法是:分别称取蜜柑草粉末各0.1g,置于2个带塞三角烧瓶中,一个加入石油醚(60~90℃)20ml,另一个加氯仿20m1,振摇提取1.5小时,过滤,滤液分别加试剂稀释至25ml。在紫外分光光度计上于190~400nm波长范围内测定紫外吸收光谱。(5)以槲皮素、柯里拉京为对照品用薄层色谱法对蜜柑草进行鉴定。(6)按照中国药典2005年版一部的要求对蜜柑草的水分、灰分和浸出物进行检查。(7)采用高效液相色谱法测定蜜柑草中槲皮素、柯里拉京的含量,以槲皮素、柯里拉京为对照品,用合适的色谱柱,适宜的流动相、流速、检测波长和柱温,测定蜜柑草中槲皮素和柯里拉京的含量。
结果植物形态:蜜柑草为一年生草本,高15~60cm。全株光滑无毛。茎直立,分枝细长。叶互生,具短柄;托叶小,2枚;叶片条形或披针形,长8~20mm,宽2~5mm,先端尖,基部近圆形。花簇生或单生于叶腋;花小,单性,雌雄同株;无花瓣;雄花萼片4,花盘腺体4,分离,与萼片互生,无退化子房;雌花萼片6,花盘腺体6,子房6室,柱头6。蒴果有细柄,下垂,圆形,直径约2mm,褐色,表面平滑;种子三角形,灰褐色,具细瘤点。花期7~8月,果期9~10月。生于山坡、路旁。分布于东北及河北、陕西、江苏、安徽、浙江、福建、湖北、湖南、广西、贵州等地。
药材性状:根梢斜生,表面黄棕色,常带有须根。茎圆柱形,长20~60cm,直径1~3mm,表面黄绿色,光滑无毛,分枝较多,茎上部分及分枝两侧具翅状纵棱。叶两侧互生,披针形,顶端渐尖,基部近圆形,长5~20mm,宽3~7mm,表面黄绿色,背面色稍浅,主脉一条,背面突出明显,叶柄短,近无柄。蒴果扁圆形,单生于叶腋,具钝三棱,直径约2mm,表面有细小瘤状突起。茎质地硬脆,易折断,断面黄白色。气微,味淡、味涩。
显微鉴定茎横切面(直径2.5mm)呈圆形。表皮组织由一列薄壁细胞组成,细胞长方形,外被角质层。皮层较窄,由类圆形薄壁细胞组成,含有叶绿素。韧皮部狭窄,外侧有纤维束。形成层不明显。木质部宽广,导管径向排列,直径31~50μm,木纤维较多,横断面呈类方形、类圆形,直径15~32μm,壁厚2~8μm,木化。射线细胞1列。髓部由薄壁细胞组成,细胞呈类圆形。
叶横切面上、下表皮均由1列细胞组成,细胞呈类方形或类长方形,大小不一。上表皮下方有栅栏细胞1列,并通过中脉上方;海绵组织由薄壁细胞组成,细胞内含有草酸钙簇晶,直径10~21μm。主脉下面突起明显,在上、下表皮内侧有厚角组织,维管束外韧型,木质部在上方,韧皮部在下方。
药材粉末药材粉末呈黄绿色。纤维较多,常呈束存在,细长,长160~840μm,直径15~32μm,壁厚,胞腔狭窄。表皮组织碎片常见,叶上表皮细胞波状弯曲,气孔较少;叶下表皮细胞壁稍弯曲,气孔多数;茎表皮细胞长方形,壁平直,增厚,有气孔;气孔平轴式,2个副卫细胞大小不一。草酸钙簇晶棱角明显,直径8~22μm,在叶肉组织中常排列成行。导管可见螺纹、孔纹、网纹导管,直径15~30μm。茎薄壁组织成碎块,细胞长方形,表皮细胞外壁具有较厚的角质层。
紫外光谱鉴定:石油醚提取液在209nm,氯仿提取液在241.9nm处分别有一个最大吸收峰。
薄层色谱鉴定:对蜜柑草中的槲皮素和柯里拉京进行了薄层鉴定。检查:水分不得过8.62%;总灰分不得过7.58%;酸不溶性灰分不得过1.07%;浸出物含量不得低于5.36%。
含量测定:蜜柑草中槲皮素的含量不得低于0.012%,柯里拉京的含量不得低于0.154%。
结论本研究首次系统的研究了蜜柑草的植物形态、药材性状特征、显微特征、理化鉴别及有效成分含量测定等生药学内容,建立了蜜柑草的质量标准(草案)。