转录因子PtMYB194调控杨树对水分胁迫抗性的功能研究

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiandande
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着全球气候变暖,干旱和淹水现象发生日益严重,已成为自然界植物遭受的主要非生物胁迫。解析植物对于水分胁迫的适应机理对于抗逆性育种具有重要的理论与实践意义。杨树(Populus)具有速生、易繁殖和用途广泛等特点,已成为世界范围内重要的造林树种,具有重要的经济价值和生态价值。在生产实践中,干旱与淹水胁迫仍然是杨树面临的主要逆境胁迫,造成木材产量和生态功能的巨大损失。解析杨树对干旱与淹水胁迫的适应机制,挖掘抗旱/抗涝基因是培育抗逆性强的杨树良种的重要前提。课题组前期通过对I-69杨(P.deltoides cv.Lux ex.I-69/55)×小叶杨(P.simonii)的全同胞子代LS1(抗涝)与LS2(不抗涝)在淹水胁迫下细根的转录组分析,筛选了PtMYB194抗逆候选基因,并成功构建了该基因的超表达(OE)载体和抑制表达(RNAi)载体。在此基础上,本研究首先以南林895杨(P.×euramericana‘Nanlin 895’)为试验材料,通过农杆菌介导的叶盘转化法,获得PtMYB194基因的超表达和抑制表达转基因苗。然后,分别通过干旱和淹水胁迫试验,比较了PtMYB194基因超表达、抑制表达和野生型(WT)的南林895杨在表型、生长量、生物量、叶片气体交换参数、叶绿素荧光和生理代谢等方面的响应差异,评价了PtMYB194基因调控杨树抗旱和抗涝性的功能。主要研究结果如下:(1)通过农杆菌EHA105介导转化法对南林895的叶片和叶柄进行转化,用红色荧光蛋白Ds Red和DNA-PCR检测,筛选鉴定得到PtMYB194阳性苗64株。其中,34株为超表达(OE)转化苗,30株为抑制表达(RNAi)转化苗。采用q RT-PCR的方法测定PtMYB194的64个转基因株系的表达量。从OE的阳性苗中挑选了PtMYB194基因表达量显著上调的3个株系OE-16、OE-18和OE-26,其在叶片中的表达量分别比WT提高了575.0倍、757.9倍和347.9倍,在细根中的表达量分别比WT提高了165.7倍、128.3倍和87.0倍。从RNAi的阳性苗中挑选了PtMYB194基因表达量显著下调的3个株系Ri5、Ri12和Ri39,其在叶片中的表达量分别为WT的0.30倍、0.31倍和0.46倍,在细根中的表达量分别为WT的0.41倍、0.45倍和0.48倍。(2)以WT、超表达株系(OE16、OE18、OE26)和抑制表达株系(Ri5、Ri12、Ri39)为试验材料,开展了为期20 d的干旱处理(DS20),随后复水恢复5 d(DS25),研究不同株系对干旱胁迫的响应差异。结果表明:所有株系的形态、生长量、生物量、叶片气体交换参数、叶绿素荧光和生理代谢均受到干旱胁迫的影响。干旱胁迫对WT植株的苗高、地径生长量和生物积累的抑制作用显著高于超表达株系,而略低于抑制表达株系。同时,干旱胁迫下,超表达株系的叶片气体交换参数、叶绿素荧光、叶绿素相对含量(SPAD值)和含水量的抗旱系数均大于WT植株,且前者叶片和细根中的丙二醛含量以及叶片相对电导率的上升幅度较小,显示出更强的抗旱能力,而抑制表达株系的变化幅度略高于WT,表现出较差的抗旱能力。通过隶属函数分析发现,各个株系的抗旱能力排序为:OE18>OE16>OE26>Ri39>WT>Ri5>Ri12,说明PtMYB194基因具有调控杨树抗旱性的功能,超量表达PtMYB194基因提高了杨树在干旱胁迫下的耐受性。(3)以WT、超表达株系(OE16、OE18、OE26)和抑制表达株系(Ri5、Ri12、Ri39)为试验材料,开展了为期30 d的淹水处理(PS30),随后排水恢复10 d(PS40),研究不同株系对淹水胁迫的响应差异。结果表明:所有株系的形态、生长量、生物量、叶片气体交换参数、叶绿素荧光和生理代谢均受到淹水胁迫的影响。相比于WT植株,超表达株系在淹水胁迫下诱导的不定根较短,而抑制表达株系诱导的不定根较长。淹水胁迫对WT植株的苗高、地径生长量和生物积累的抑制作用显著低于超表达株系,而略高于抑制表达株系。同时,淹水胁迫下,WT植株的叶片气体交换参数、叶绿素荧光、叶绿素相对含量(SPAD值)和含水量的抗涝系数均大于超表达株系,且前者的叶片和细根中的丙二醛含量以及叶片相对电导率上升幅度较小,显示出超表达株系较差的抗涝能力,而抑制表达株系的变化幅度略低于WT,表现出较强的抗涝能力。通过隶属函数分析发现,各个株系抗涝性排序为:Ri12>Ri5>Ri39>WT>OE26>OE16>OE18,说明PtMYB194基因具有调控杨树抗涝性的功能,超量表达PtMYB194基因降低了杨树对淹水胁迫的耐受性。
其他文献
<正>2021年秋季学期,玉溪第一小学落实"双减"及"五项管理"政策,全面启动"童心课程1+X课后服务乐童计划",从家长和孩子的现实需求出发,以促进学生身心健康成长为目的,通过强意识、建机制、落举措、增实效,积极创新课后服务模式,"接住"放学的孩子,让家长放心、社会满意。目前,玉溪第一小学课后服务课程项目达80余个,实现校级、年级、班级三个维度全覆盖,学校五个校区共五千余名学生都能享受到课后服务。
期刊
农村基层的稳定是中国社会稳定的先决条件,农村基层的秩序也是构成中国社会秩序的关键要素。发端于20世纪80年代的村民自治是我国农村基层政治体制建设过程中的一项具有历史意义的实践成果,现有研究对村民自治的由来和村民自治的实践、未来的改革与走向研究得较为充分,但是对村民自治制度从产生到政策吸纳这一中间环节,尚未进行充分的解释。本文聚焦于村民自治制度的创新过程研究,旨在阐释村民自治制度的发生及形成机制,宏
学位
伴随着世界能源问题和环境逐渐严重,石油需求量和开采量与日俱增,寻找并利用可代替石油的能源,大力发展清洁能源,促进世界能源可持续发展成为世界关注的重要议题。石油作为其中最为重要的能源,有效降低石油使用量,减少二氧化碳的排放量,尽可能多的使用清洁能源和可再生能源是实现世界绿色可持续发展目标的重要环节。我国作为发展中国家,始终为世界发展积极贡献力量,始终致力于大力发展新能源产业,尤其是新能源汽车行业,更
学位
随着我国社会老龄化水平不断提升,老年人群体对于医疗服务和养老服务的迫切需求与日俱增,政府面临严峻的养老形势。同时我国社会仍存在医疗和养老服务供给不足、医疗资源分配不均等问题,政府的养老压力进一步增大。为此,政府有必要整合现有的医疗资源和养老资源,创新医疗和养老服务供给模式,促进医养结合服务的实践应用,切实解决老年人的养老需求。具体来看,公立医疗机构由于成本问题难以提供大规模的医养结合服务,因此政府
学位
在植物中,生长发育和免疫反应都是耗能的过程。高抗病性往往意味着低生长力,这与植物的适应性成本相关,而植物需要平衡抗病性和生长发育来完成正常的生命周期。植物基因组编码大量具有核苷酸结合位点和富含亮氨酸重复序列的免疫受体NLR。NLR能介导由病原物分泌的效应子触发的免疫反应(ETI)。NLR免疫受体通过NDR1蛋白和EDS1蛋白来诱导植物超敏反应从而抵御外界病原物的入侵。miRNA(micro RNA
学位
随着当今世界正在迈入知识经济时代,高层次人才作为引领发展、实现创新的第一资源,正成为各国战略发展的瞩目焦点。作为我国首都,北京具有极其重要的战略意义和战略地位,而高层次人才作为一个城市可持续发展的战略基石,其在北京发展乃至全国发展中更是重中之重。自人才强国战略实施以来,北京市一直坚持“聚天下英才而用之”的战略理念,先后制定和出台了一系列的高层次人才战略规划和人才政策文件,为达到引才、育才、用才、留
学位
氮素与茶鲜叶产量与品质密切相关,氮素高效利用是茶树栽培可持续发展的关键。本研究以‘中茶108’一年生扦插苗为材料,采用不同浓度硝态氮进行营养液培养,对其嫩叶和根进行不同时间点的取样和基于时间序列的转录组分析,明确茶树不同组织在不同氮素水平下转录水平的动态变化规律;通过组织间、不同氮浓度处理及不同时间点的转录组差异分析,挖掘茶树氮响应和吸收利用相关的基因并构建这些基因的共表达网络,并初步研究了茶树氮
学位
渥堆发酵中微生物及其分泌的胞外酶参与茶叶品质成分转化是青砖茶品质形成的关键,来自微生物的果胶酶对茶叶品质形成具有显著贡献。然而产果胶酶微生物对青砖茶品质形成的影响尚不清楚。为此,本试验对青砖茶发酵过程中产果胶酶的微生物进行筛选和鉴定,利用高产果胶酶的菌株Q33发酵茶叶,并对其产酶条件进行探究,初步了解其对青砖茶品质形成的影响。主要研究结果如下:1.本研究初步获得了68株具有产果胶酶的菌株:45株霉
学位
跨域环境协作治理是解决区域复杂公共问题和实现区域可持续发展的重要治理模式。我国科层制管理机制在跨行政区域流域治理中出现种种矛盾,看似分工明确、责任到位、各主体各司其职的治理机制在涉及到跨行政区域生态环境协作治理时往往陷入集体行动的困境。当前,学术界对于社会网络视角下地方政府跨域环境治理“碎片化”问题的认识尚有不足,社会网络理论在处理中国情景下地方政府协作治理问题中的运用还有待进一步实践,这就需要建
学位
2019年12月突如其来的新冠疫情给我国的治理能力带来了严峻的考验。整个疫情防控工作中,全国人民共同抗“疫”,这其中健康码、通信行程卡等数字治理工具发挥了重要的作用。在疫情爆发初期,数字治理工具的加入给我国疫情防控工作带来了新的希望和动力。相关数字治理工具的陆续出现,实现了全国跨省市、跨领域、跨层级、跨部门联动,迅速整合全国的资源和力量,形成一股强大的合力注入疫情防控工作中,极大地提升了我国疫情防
学位