流行性乙型脑炎(Japanese encephalitis，JE)也称乙脑，是一种严重的急性神经系统传染病，主要通过携带乙脑病毒的蚊媒叮咬传播，致死率可达30%，且后遗症严重。我国研制的乙脑减毒活疫苗自1989年上市至今已在很多乙脑流行的国家和地区广泛应用。用于乙脑减毒活疫苗生产的SA14-14-2，是由亲本野毒株SA14经过在细胞和动物中连续传代和多轮蚀斑纯化而获得的一株减毒株。然而，疫苗株毒力回复的可能性仍然存在，也是减毒活疫苗生产和应用中最为关注的问题。为了探究疫苗株SA14-14-2在体内和体外的遗传和减毒特征稳定性，我们将其在Vero细胞和鼠脑中连续传代，进而比对基因序列和毒力特征评价。结果显示，疫苗株SA14-14-2通过Vero细胞的12次传代后，只有C蛋白第66位的Ser突变为Leu。此外，子代病毒仍能维持小斑特征；进一步的毒力评价实验的结果表明，子代病毒仍然具有明显的减毒特征。值得注意的是， SA14-14-2在鼠脑内经过连续传代后，基因组发生了一系列的适应性突变。这些突变均位于E蛋白，分别为E-107（F→L）、E-138（K→E）、E-226（T→R）和E-270（I→T）。毒力评价的结果也显示，传代病毒的神经毒力明显提高，神经侵袭力也有所增强。这表明，乙脑疫苗株SA14-14-2通过鼠脑传代所产生的适应性突变可能与小鼠的神经毒力和神经侵袭力的增强密切相关。本研究有助于乙脑减毒活疫苗的质量控制，同时也为帮助了解黄病毒疫苗的减毒机制提供理论依据。