5-氮杂-2’-脱氧胞苷对SW48结肠腺癌细胞生物学行为的影响

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[目的]:探讨在DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2,-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)的化学干预下,SW48结肠腺癌细胞株中抑癌基因RASSF1A与甲基化的调控的关系,并辅以流式细胞仪检测细胞生长周期及凋亡率的变化,探讨其临床治疗的可能性。[方法]:分别使用浓度为0.4μmol/L,1.6μmol/L,6.4μmol/L,25.6μmol/L,102.4μmol/L特异型DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2,-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理大肠腺癌细胞株SW48。通过MTT来检测5-氮杂-2,-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对大肠癌细胞株存活率的影响,并绘出其生长曲线。应用流式细胞术检测甲基化5-氮杂-2,-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对SW48结肠腺癌细胞株生长周期及凋亡率的影响。RT-PCR检测药物处理前后抑癌基因RASSF1A mRNA表达的改变。[结果]:(1)经MTT检测,发现5-Aza-CdR对SW48腺癌细胞增殖的抑制作用在一定范围内呈剂量和时间依赖性,5-氮杂-2,-脱氧胞苷在1.6μmol/L就可以明显的抑制SW48结肠腺癌细胞的增殖。(2)流式细胞术检测发现细胞周期中处于G0/G1期的细胞明显地增多,阻滞于G1期,凋亡率增高,而且以上作用与药物作用浓度,时间在一定范围内呈正相关。(3) RT-PCR:经5-Aza-CdR处理后,无RASSF1A表达的SW48结肠腺癌细胞株可检测出RASSF1A基因的重新表达,并且在一定剂量范围内随着药物剂量的增加,RASSF1A表达也增强。[结论]:DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2,-脱氧胞苷可消除抑癌基因RASSF1A启动子甲基化状态,使其重新表达,从而抑制SW48结肠腺癌细胞株的生长。
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