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目的成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)是一种较常见的牙源性上皮性肿瘤,约占牙源性肿瘤的60%以上。虽属良性肿瘤,但其生长具有局部侵袭性,术后复发率较高,也有恶变甚至远处转移的零星报道。它沿松质骨的骨小梁浸润性生长,若发生在下颌升支和上颌磨牙区,这些部位的肿瘤可直接扩展至眼眶、上颌窦或颅底部而危及生命。细胞外基质(extracellular matrix,ECM)是肿瘤细胞在侵袭和转移中面临的主要屏障,肿瘤的侵袭和转移是从通过各种蛋白水解酶如基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)等降解细胞外基质开始的。基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)又称基质溶解因子(matrilysin),为MMPs家族中的最小成员,其表达与恶性肿瘤的发生以及病人的预后密切相关。关于MMP-7的功能、调控机制和在肿瘤中的表达尚不十分明确,现已越来越受到广大学者的关注。本实验应用免疫组化、Western Blot、RT-PCR等方法对人ABs中MMP-7蛋白和MMP-7mRNA表达进行检测,探讨MMP-7与人ABs生物学行为的相关性和在该肿瘤的发生、发展中起到的重要作用。材料与方法1、免疫组化标本来自中国医科大学口腔医学院和第一临床医学院病理科2001～2007年存档蜡块。采用免疫组化S-P法对100例ABs(其中8例AB癌),27例(颊、牙龈)正常口腔粘膜(normal oral mucosa,NOM),26例牙源性角化囊性瘤(keratocystic odontogenic tumor,KCOT)组织标本进行MMP-7蛋白表达的检测。结果按显色的强弱及阳性细胞所占的比例分级。2、Western Blot和RT-PCR分别检测收集到的中国医科大学口腔医学院病理科2004年至2006年以-72℃冻存的标本。采用Western Blot检测18例ABs及2例NOM中MMP-7蛋白的表达情况。采用RT-PCR检测21例ABs及3例NOM中MMP-7的mRNA表达情况。结果1、免疫组化MMP-7在人类原发ABs、复发ABs、AB癌、KCOT中都有MMP-7的明显表达,KCOT阳性率最高,为96.15%,依次为复发ABs为91.43%、原发ABs为87.72%;正常口腔粘膜也有表达其阳性率为70.37%。采用四格表资料的Fisher确切概率X~2检验,其中KCOT与NOM有显著性差异(P=0.024)、良性ABs与NOM有显著性差异(P=0.029)、复发ABs与NOM有显著性差异(P=0.045);ABs与NOM有显著性差异(P=0.029);而NOM与原发ABs无显著性差异(P=0.069)、NOM与AB癌无显著性差异(P=0.648);KCOT与ABs(包括原发ABs P=0.425、复发ABs P=0.629、AB癌P=0.421)无显著性差异,原发ABs与复发ABs无显著性差异(P=0.736)。ABs中MMP-7表达主要在胞浆,以中度阳性和弱阳性为主,位于牙源性上皮的外周柱状或立方状细胞及中心星网状层细胞浆中;MMP-7表达具有异质性,分化较好的角化细胞中表达为强阳性,而在原始胚胎细胞中表达往往呈阴性或弱阳性;在炎细胞、血管内皮细胞、纤维细胞胞浆中MMP-7也有阳性表达。在NOM中MMP-7主要表达在表层和棘细胞浅层。AB癌中MMP-7的表达为中度阳性或弱阳性。2、Western Biot印迹分析和RT-PCRWestern Blot印迹分析显示:在18例ABs中MMP-7蛋白的表达明显增高,而在2例NOM中表达较低,两者有显著性差异(t=2.245,P=0.038);RT-PCR显示:21例ABs中,7例(33.33%)可见MMP-7 mRNA表达,3例正常粘膜中却未见表达,两者有显著性差异(t=3.030,P=0.007)。3、相关性分析MMP-7的蛋白和mRNA表达之间无相关性(r=0.333,P=0.290)。结论1、ABs中MMP-7在mRNA水平和蛋白质水平上都有表达,且明显高于正常粘膜。2、MMP-7可能参与ABs的发生发展;ABs的侵袭性、ABs的复发率与MMP-7的高表达相关。