目的：探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs)免疫抑制作用的影响。方法：采用全骨髓贴壁培养法分离培养小鼠BMSCs,观察其细胞形态学变化；应用流式细胞术鉴定小鼠BMSCs表面标志物CD29、CD34和CD44的表达；应用免疫荧光法检测小鼠BMSCs的CXCR4的表达；通过油红O和阿尔新兰染色分别来鉴定BMSCs成脂和成软骨诱导；Elisa试剂盒检测细胞培养上清液中白介素-10(IL-10)和前列腺素2(PGE2)的表达；通过免疫印迹实验(Western Blot)检测培养细胞的环氧化物水解酶2(COX-2)和NF-κB蛋白水平的表达。结果：体外培养的小鼠BMSCs快速贴壁并呈现克隆性生长,集落中心增殖的细胞大多为圆形,边缘细胞呈梭形；流式细胞术鉴定观察到小鼠BMSCs表面标志物CD29阳性表达率为84.89%,CD44阳性表达率为95.77%,而CD34呈阴性表达；免疫荧光检测到CXCR4的阳性表达率达到100%；油红O和阿尔新兰染色后明显看到BMSCs分化为脂肪细胞及软骨细胞；Elisa试剂盒检测25ng/ml和5Ong/ml TNF-α处理组上清液中IL-10的表达水平和对照组相比没有明显的增加,而在100ng/ml TNF-α刺激时,细胞上清液中IL-10的表达水平较对照组明显增加(p=0.002<0.05),而细胞上清液中PGE2的表达也有相似的结果,在100ng/ml TNF-α刺激时,PGE2(p=0.02<0.05)的表达水平明显高于对照组,免疫印迹法检测TNF-α处理组COX-2表达水平明显高于对照组(p=0.02<0.05),NF-κB的表达也明显增加(p=0.025<0.05)。结论：较高浓度的TNF-α可能通过NF-κB信号通路,明显增强小鼠BMSCs的免疫抑制作用。