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microRNA作为生长发育的重要调节因子参与到植物的赤霉素信号转导途径。葡萄是对赤霉素高度敏感的植物。赤霉素对葡萄花的发育、果实的膨大与成熟、坐果以及无核诱导等具有重要的作用。本研究对两个响应赤霉素信号的miRNA及其靶基因在葡萄花发育过程中的作用进行了分析。主要研究结果如下:1.前期研究发现葡萄VvmiR061能够响应赤霉素。本研究克隆得到了 VvmiR061的两个靶基因VvREV和VvHOX2。VvREV定位于细胞核和细胞膜,VvHOX32定位于细胞膜。利用赤霉素处理葡萄花序并对不同发育时期花和果实的VvmiR061和其靶基因VvREV和VvHOX32表达进行分析。结果表明,赤霉素能够上调VvREV和VvHOX32的表达,下调VvmiR061的表达。赤霉素处理降低了 VvmiR061对VvREV和VvHOX32的裂解作用。本研究的结果表明VvmiR061可以响应赤霉素信号,并参与葡萄花发育的调控,丰富了葡萄small-RNA介导的调控作用的认识。2.将葡萄VvREV和VvHOX32基因利用农杆菌介导的叶盘法转化烟草。转基因烟草表现出植株变高,早花的现象。通过对转基因烟草开花相关基因的表达进行了检测,发现转VvREV基因烟草的NtFT基因表达量高于野生型,而NtFLC基因则是低于野生型烟草;转FvHOX32基因烟草的NtFLC基因的表达量量低于野生型。这说明了VvREV和VvHOX32通过调控FT和FLC基因的表达来调控花发育。3.以’魏可’葡萄(Vitis vinifera L.’Wink’)为试材,克隆得到一个葡萄赤霉素信号途径中的MYB转录因子VvGAMYB基因,该基因开放阅读框(ORF)区长1680bp,编码559个氨基酸,该蛋白序列含有GAMYB基因家族保守的结构域R2R3DNA结合域以及Box1、Box2、Box3保守域。洋葱表皮细胞的瞬时表达结果显示,VvGAMYB定位于细胞核中。VvGAMYB和其下游基因VvLFY在葡萄花发育过程中表达都呈现上升趋势,赤霉素处理促进了VvGAMY 和VvLFY的表达从而使开花提前。VvGAMYB是VvmiR159的靶基因,其作用受到miR159的调控。miR159的表达和VvGAMYB的表达呈负相关,赤霉素处理下调其表达从而降低了对VvGAMYB的裂解作用。上述结果可以看出VvGAMYB通过赤霉素开花途径参与葡萄的开花过程。在这一过程中,赤霉素抑制miR159裂解VvGAMYB的作用,从而上调VvLFY的基因表达,参与了调控葡萄开花过程。