SARS-CoV棘突蛋白、核衣壳蛋白在E.coli中的表达及免疫活性分析

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hongfengye365
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
2002年11月在我国广东省流行的“严重急性呼吸综合征”(SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS),是一种危害人民生命健康的急性传染病,仅半年多的时间里,就遍布于全球29个国家和地区,对全球经济发展造成严重的影响。SARS的病原体是一种新的冠状病毒,世界卫生组织2003年4月16日正式将其病原体命名为SARS冠状病毒(SARS-CoV)。 SARS-CoV是有包膜的正链RNA病毒,主要的蛋白质有RNA复制酶(复制酶Ia,Ib),核衣壳蛋白N(nucleocapsid),棘突蛋白S(spikeprotein),膜蛋白M(membraneprotein),小分子膜蛋白E(smallmembraneprotein)。该病毒至少有14个可能的开放阅读框架(ORFs)。S蛋白是SARS-冠状病毒主要的结构蛋白,也是结构蛋白区编码的最大的蛋白质,构成了病毒重要的抗原成分。N蛋白与病毒RNA紧密结合,缠绕在病毒基因组的表面形成螺旋状核壳体,在RNA的转录和病毒的形态发生过程中起着重要的作用。 本文通过对医务人员及SARS患者等进行跟踪调查,掌握了SARS在天津市流行的一般情况,发病初期主要在医院内爆发流行,其中医务人员感染者多,比例高,死亡天数与年龄成反变关系等,并对SARS流行特点进行了初步的分析。同时应用生物信息学技术,界定冠状病毒SARS-CoVS蛋白和N蛋白的抗原决定区域,通过PCR扩增相应片段,克隆至原核表达载体pET-H,得到七个重组质粒pET-HS1、pET-HS3、pET-HS4、pET-Hs5、pET-HNl、pET-HN3及pET-HN4,经序列测定读码框正确,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导,pET-HS1、pET-HS3、pET-Hs4、pET-HS5、pET-HN1及pET-HN4获得高效表达。表达产物经紫外薄层扫描显示目的蛋白占菌体细胞总蛋白量的20-30%。经Westernblot检测,表达蛋白与恢复期SARS病人血清呈高反应原性。纯化相应蛋白免疫小鼠,所获抗血清效价达1:3×103。与SARS诊断试剂反应呈阳性,这些工作将为进一步研究SARS的流行规律,S蛋白、N蛋白的定位、功能及SARS的预防和诊断提供帮助。
其他文献
目的 探讨依帕司他联合甲钴胺治疗糖尿病周围神经病变的效果.方法 选取2018年4月~2019年4月我科收治的糖尿病周围神经病变患者192例,随机分为2组各192例,观察组给予依帕司他联
目的 观察羟苯磺酸钙在糖尿病微血管病变患者治疗中的临床效果.方法 选取本院收治的80例糖尿病微血管病变患者,将40例采用羟苯磺酸钙进行治疗的患者作为对照组;将40例采用羟
目的 探究妊娠期糖尿病患者治疗中门冬胰岛素(诺和锐)与生物合成人胰岛素注射液(诺和灵R)治疗的应用效果.方法 抽选2018年05月-2019年06月入我院进行治疗的妊娠糖尿病患者为
阴离子通道是细胞膜上的跨膜蛋白分子,允许阴离子顺化学梯度进出细胞。Cl-是生物体内含量最丰富的阴离子,在生理条件下阴离子通道主要是Cl-通过,因此,阴离子通道也被称为氯离
科技的高速发展使人类社会大步迈入了网络时代,很多现实世界的复杂系统都可以表示为网络,如协作网,万维网,电力网,生物网和社会网络等。网络可以模型化为图,其中节点表示对象
目的 研究罗格列酮联合二甲双胍对2型糖尿病患者治疗效果、安全性差异.方法 选取我院2018年1-12月108例2型糖尿病患者,随机分为实验组、对比组,实验组加用罗格列酮治疗,对比
延迟锁相环电路是目前高频时钟产生电路中的重要研究课题之一。和传统的锁相环相比,延迟锁相环内采用了压控延迟线,其时钟抖动更低,在系统稳定性、增益、带宽方面具有无可比
在高速铁路或城市轨道交通系统运行过程中,如何保证在车-地间实现各类信息的实时、高速、高品质的宽带通信是一个非常重要的研究问题。由于社会经济发展对于提升列车运营速度
目的 了解我院近年来口服降糖药的使用情况,为临床合理用药提供参考.方法 对2016—2018年我院口服降糖药常用品种的用量、销售金额、用药频度(DDDs)、限定日费用等进行统计分
目的 分析二甲双胍与枸橼酸氯米芬联合治疗多囊卵巢综合征的临床疗效.方法 采取随机分组法,选取我院2018年1月-2019年1月收治的44例患有多囊卵巢综合征的患者为研究对象,分为