恶性肿瘤是一大类严重威胁人类生命和健康的疾病，胃肠肿瘤在恶性肿瘤谱中占据重要的地位，发病率尚在逐年增加，死亡率虽有所改善，但仍居高不下。手术是胃肠肿瘤的主要治疗方法，但单纯手术的疗效相当有限。化疗占有越来越重要的地位，但目前疗效仍不理想。肿瘤是一个异质性、多态性、分化不均的细胞群体，肿瘤多药耐药普遍存在，这些都会影响化疗效果。不当的化疗不但不能缓解病情，尚有可能诱发多重耐药，导致治疗失败。因此，为实现化疗个体化，防止多药耐药的发生，通过预测个体肿瘤对药物的敏感性来指导临床治疗，以提高疗效，早已成为化疗界瞩目的问题。 国内外临床研究表明，肿瘤体外药敏检测与临床疗效存在一定的相关性，可较好地指导临床用药，提高疗效，延长患者生存。但传统的单层细胞培养药敏试验与临床实际存在一定差别，限制了它们在临床上的应用。更多学者开始寻求敏感、标准化、快速、简易且与临床相关性好的方法，希望能建立反映体内肿瘤真实生长情况的药敏试验模型。 肿瘤化疗失败的一个主要原因是多药耐药性，膜糖蛋白介导的药物外排机制是研究最多的机制，此类膜糖蛋白主要有P-糖蛋白，多药耐药相关蛋白，乳腺癌耐药相关蛋白和肺耐药相关蛋白。这些蛋白的高表达和肿瘤的耐药性明显相关。 本研究通过三维培养体外药敏试验来评估胃肠肿瘤对常用化疗药物的单药和联合用药的敏感性，与临床报道相比较，并确立方法学的可行性；通过测定胃肠肿瘤多药耐药基因表达产物水平，探讨其与体外药敏试验的相关性。 第1章胃肠肿瘤三维培养体外药敏试验。 目的：通过三维培养体外药敏试验来评估胃肠肿瘤对常用化疗药物的单药和联合用药的敏感性，并确立方法学的可行性。 方法：收集2007年11月至2008年2月中山大学附属肿瘤医院40例胃肠肿瘤新鲜手术标本。应用三维培养药敏试验技术，评估表阿霉素、顺铂、草酸铂、5-FU、泰素帝、伊立替康6种单药和5-Fu+表阿霉素+顺铂、5-FU+伊立替康、5-FU+草酸铂、5-FU+泰素帝+顺铂4组联合用药的抑制率和敏感率。 结果：胃癌中，单药组抑制率和敏感率最高都是5-FU(分别为29.8％和50％)；联合用药组抑制率最高为5-FU+泰素帝+顺铂(59.8％)，敏感率最高为5-FU+表阿霉素+顺铂(77.3％)。肠癌中，单药组抑制率和敏感率最高都是5-FU(分别为20.7％和38.9％)；联合用药组抑制率最高为5-FU+奥沙利铂(54.1％)，敏感率最高为5-FU+泰素帝+顺铂(66.7％)。联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组(P<0.05)。 结论：在单药组中，抑制率和敏感率最高者均为5-Fu。联合用药组中，胃癌组抑制率和敏感率最高分别为5-FU+泰素帝+顺铂和5-FU+表阿霉素+顺铂；肠癌组抑制率和敏感率最高分别为5-FU+奥沙利铂和5-FU+泰素帝+顺铂。 第2章肿瘤多药耐药基因表达产物mRNA及蛋白水平分析 目的：通过测定引起胃肠肿瘤原发耐药的多药耐药基因表达产物水平，探讨其与体外药敏试验的相关性。 方法：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法测定此40例胃肠肿瘤MDR1、MRP1、ABCG2的mRNA和蛋白表达水平。 结果：MDR1、MRP1、ABCG2蛋白在胃癌中的阳性表达率分别为36.4％，54.5％，36.4％，在肠癌中的阳性表达率分别为55.6％，33.3％，50.0％；MDR1、MRP1、ABCG2mRNA在胃癌中阳性表达率分别为90.9％，54.5％，77.3％，在肠癌中阳性表达率分别为88.9％，55.6％，67.5％；MDR1、MRP1、ABCG2蛋白高表达与肿瘤对表阿霉素的耐药有相关性(P<0.05)。 结论：多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2蛋白在胃肠肿瘤高表达与对表阿霉素的耐药有相关性，提示这三种耐药基因可能参与介导了表阿霉素的耐药。