银杏叶提取物对小鼠体内外免疫调节活性的研究

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目的本文以体外小鼠脾淋巴细胞、腹腔巨噬细胞为靶细胞,建立银杏叶提取物(Extract of Ginkgo Biloba,EGB)调节其免疫功能的模型,检测EGB对巨噬细胞吞噬功能、脾淋巴细胞增殖和脾淋巴细胞分泌细胞因子的影响,从而明确EGB的体外免疫调节活性;通过建立环磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)致免疫功能低下小鼠模型,检测EGB对免疫抑制小鼠免疫器官指数的影响、检测脾淋巴细胞分泌细胞因子IL-4、IL-12、IL-13和IFN-γm RNA的表达水平,明确EGB的体内免疫调节活性及作用机制,为EGB的开发和利用提供实验依据。方法本文以体外小鼠脾淋巴细胞、腹腔巨噬细胞为靶细胞建立银杏叶提取物调节其免疫功能的模型,采用MTT法检测EGB对脾淋巴细胞增殖的影响;采用ELISA法检测EGB对脾淋巴细胞分泌细胞因子的影响;采用MTT法检测EGB对感染金黄色葡萄球菌的脾淋巴细胞增殖和巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的影响。通过称重法检测EGB对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫器官指数的影响;采用RT-PCR法检测EGB对环磷酰胺致免疫抑制小鼠脾淋巴细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-12、IL-13和IFN-γm RNA表达水平的影响。结果EGB单药组、EGB与刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)复合药组刺激脾淋巴细胞,均能提高脾淋巴细胞的刺激指数,但复合药各剂量组对脾淋巴细胞刺激指数均低于单药组;EGB单药组刺激脾淋巴细胞,能够增强脾淋巴细胞IL-4、IL-12、IL-13和IFN-γ细胞因子的分泌。在金黄色葡萄球菌感染脾淋巴细胞时,EGB单药组刺激能够提升脾淋巴细胞的刺激指数;EGB单药组、EGB与刀豆蛋白A(Con A)或脂多糖(LPS)复合药组刺激巨噬细胞,均能增强巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的功能,但复合药组对巨噬细胞的吞噬功能低于单药组。EGB能提高环磷酰胺致免疫抑制小鼠的脾脏指数和胸腺指数;提高脾淋巴细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-12、IL-13和IFN-γm RNA的表达水平。结论不同浓度EGB组均能增强脾淋巴细胞的增殖,从而提高脾淋巴细胞的免疫调节活性。不同浓度EGB组能提高感染金黄色葡萄球菌的脾淋巴细胞增殖能力,说明EGB对脾淋巴细胞具有免疫调节活性。不同浓度EGB组均能增强巨噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的能力,说明EGB能提高巨噬细胞的免疫调节活性。EGB能增强免疫抑制模型小鼠脾脏指数和胸腺指数,说明EGB具有保护机体免疫器官的作用;EGB能提高脾淋巴细胞分泌的细胞因子IL-4、IL-12、IL-13和IFN-γm RNA的表达水平,说明EGB对脾淋巴细胞有免疫调节作用。
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