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目的本实验以大肠杆菌内毒素(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的牙髓痛大鼠为研究对象,运用实时定量聚合酶链反应(R e al-tim e polymerase chain re a ction,R T-PCR)技术,观测电针“合谷”对模型大鼠牙髓及三叉神经节中P2X受体亚型P2X2、P2X3、P2X4的m RNA基因表达的影响,从而深入了解P2X受体在牙髓痛痛信息产生及传递过程中的作用,以期探索电针“合谷”治疗牙髓痛的可能机制。方法将牙列正常的健康SD大鼠42只,随机分为6组,分别为正常组、对照组、牙髓痛组、拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组,每组7只。正常组:不进行任何处理;对照组:用小型手钻(钻头直径约1mm)在大鼠上颌两侧第二磨牙上钻孔,深入牙髓腔并暴露牙髓,用微量注射器注入浓度为5ug/ul的生理盐水(根据大鼠体重每孔注入0.5ul/100g),浸润5~6min后用牙科填料将牙洞封闭;牙髓痛组:在钻好的大鼠牙髓腔内,注入浓度为5ug/ul的大肠杆菌内毒素(LPS)溶液(根据大鼠体重每孔注入0.5ul/100g),浸润5~6min后用牙科填料将牙洞封闭;拮抗剂组:同牙髓痛组大鼠造模方法,将A-317491(0.5mg/kg)与LPS同时注入牙髓腔内,浸润后将牙洞封闭;电针“合谷”组:同牙髓痛组大鼠造模方法,造模后立即开始电针治疗,选取双侧“合谷”穴,直刺1-2mm,接HANS电针治疗仪,连续波,频率2Hz,强度lm A,每次治疗30min,每日1次,共治疗3次。拮抗剂+电针组:同拮抗剂组大鼠造模方法,造模后立即开始电针治疗,选取双侧“合谷”穴接HANS电针治疗仪,连续波,频率2Hz,强度为1m A,每次治疗30min,每日1次,共治疗3次。所有大鼠均在造模后第3天处死取材。观察大鼠体重和行为学的变化,运用RT-PCR技术检测大鼠牙髓、三叉神经节P2X受体m RNA表达。结果1.各组大鼠体重变化情况:各组大鼠体重均有增长,对照组大鼠的体重增长比正常组慢,且具有显著统计学意义(p<0.01);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组大鼠体重增长比正常组和对照组缓慢,且具有显著统计学意义(p<0.01);电针组、拮抗剂+电针组大鼠体重增长比牙髓组快,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂+电针组大鼠体重增长比拮抗剂组及电针组快,且具有显著统计学意义(p<0.01);电针组大鼠体重增长比拮抗剂组快,且具有显著统计学意义(p<0.01)。2.各组大鼠行为学表现情况:对照组与正常组大鼠皮毛光泽,行动自如,行为学表现虽有差异,但无统计学意义(p>0.05);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组行为学表现比正常组和对照组活跃,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组行为学表现均与模型组相比较安静,且具有显著统计学意义(p<0.01)。3.各组大鼠P2X2受体m RNA的表达情况各组大鼠牙髓P2X2受体m RNA的表达情况:各组大鼠牙髓均有P2X2受体m RNA的表达;对照组大鼠牙髓P2X2受体m RNA表达量稍高于正常组,但无统计学意义(p>0.05);牙髓痛组大鼠牙髓P2X2受体m RNA量明显高于正常组、对照组,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X2受体m RNA表达量高于正常组及对照组,且具有统计学意义(p<0.05);拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X2受体m RNA表达量明显低于牙髓痛组,且具有显著统计学意义(p<0.01)。各组大鼠三叉神经节P2X2受体m RNA的表达情况:各组大鼠三叉神经节均有P2X2受体m RNA表达;对照组大鼠三叉神经节P2X2受体m RNA表达量稍低于正常组,但无统计学意义(p>0.05);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠P2X2受体m RNA表达量明显高于正常组、对照组,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠三叉神经节P2X2受体m RNA表达量低于牙髓痛组,且具有统计学意义结果(p<0.05);电针组大鼠三叉神经节P2X2受体m RNA表达量显著高于较拮抗剂+电针组,且具有统计学意义(p<0.05)。4.各组大鼠P2X3受体m RNA的表达情况各组大鼠牙髓P2X3受体m RNA的表达情况:各组大鼠牙髓均有P2X3受体m RNA表达;对照组大鼠牙髓P2X3受体m RNA表达量稍高于正常组,但无统计学意义(p>0.05);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组大鼠牙髓P2X3受体m RNA表达量明显高于正常组及对照组,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X3受体m RNA表达量稍高于正常组(p<0.05);拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X3受体m RNA表达量均显著低于模型组,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂组、拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X3受体m RNA表达量均明显低于电针组,且具有显著统计学意义(p<0.01)。各组大鼠三叉神经节P2X3受体m RNA的表达情况:各组大鼠三叉神经节均有P2X3受体m RNA表达;对照组大鼠三叉神经节P2X3受体m RNA表达量稍高于正常组,但无统计学意义(p>0.05);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组大鼠三叉神经节P2X3受体m RNA表达量显著高于正常组,且具有显著统计学意义(p<0.01);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组大鼠三叉神经节P2X3受体m RNA表达量高于对照组,且有统计学意义(p<0.05);拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠三叉神经节P2X3受体m RNA表达量明显低于模型组,且具有显著统计学意义(p<0.01);拮抗剂+电针组大鼠三叉神经节P2X3受体m RNA表达量明显低于电针组,且具有显著统计学意义(p<0.01)。5.各组大鼠P2X4受体m RNA的表达情况各组大鼠牙髓P2X4受体m RNA的表达情况:各组大鼠牙髓均有P2X4受体m RNA表达;对照组大鼠牙髓P2X4受体m RNA表达量稍低于正常组,但无统计学意义(p>0.05);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X4受体m RNA表达量明显高于正常组及对照组,且具有显著统计学意义(p<0.01);电针组、拮抗剂+电针组大鼠牙髓P2X4受体m RNA表达量低于低于牙髓痛组,且具有显著统计学意义(p<0.01)。各组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA的表达情况:各组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA的表达情况:各组大鼠三叉神经节均有P2X4受体m RNA表达;对照组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA表达量稍高于与正常组,但无统计学差异(p>0.05);牙髓痛组、拮抗剂组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA表达量明显高于正常组,且具有显著统计学意义(p<0.01),牙髓痛组、电针组、拮抗剂+电针组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA表达量高于对照组,且具有统计学意义(p<0.05);拮抗剂组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA表达量高于对照组,且具有显著统计学意义(p<0.01);电针组、拮抗剂+电针组大鼠三叉神经节P2X4受体m RNA表达量低于牙髓痛组,且具有显著统计学意义(p<0.01)。结论1.P2X受体亚型P2X2、P2X3、P2X4参与LPS诱导的炎性牙髓痛大鼠痛信息的产生和传递。2.电针“合谷”对炎性牙髓痛大鼠体重和疼痛反应产生影响。3.电针“合谷”对炎性牙髓痛痛信息产生及传递的影响与P2X受体亚型P2X2、P2X3、P2X4参与相关。