清肠栓治疗DSS诱导的溃疡性结肠炎大鼠Th17/Tregs平衡调节机制研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lele3383
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目的:观察清肠栓对DSS诱导的溃疡性结肠炎大鼠干预作用,探讨其对Th17/Treg平衡的影响。方法:对SD大鼠采用5%DSS自由饮用7d建立溃疡性结肠炎模型,后将32只大鼠根据体重随机分为正常组(无菌生理盐水灌肠),模型组(无菌生理盐水灌肠),清肠栓组(清肠栓液灌肠),美沙拉嗪组(美沙拉嗪液灌肠)。灌肠给药期间观测大鼠体重、大便性状、便血和一般情况,评估疾病活动指数,治疗7d后处死大鼠。采用苏木精-伊红染色法观察并评价结肠组织学评分;采用酶联免疫吸附法测定血清中IL-2、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β含量;采用聚合酶链式反应检测结肠组织中TNF-α的m RNA表达水平;采用免疫组织化学测定结肠组织的Tregs及Th17的含量。结果:1.模型组大鼠较正常组DAI明显增高(P<0.01);经治疗后,清肠栓组和美沙拉嗪组DAI评分较模型组均明显降低(P<0.01)。2.模型组光镜下可见黏膜充血、水肿,大量炎性细胞浸润,病变深度达全层,隐窝破坏或结构改变,腺体排列紊乱,部分表面上皮脱落。模型组结肠组织病理评分显著高于正常组(P<0.01),清肠栓组和美沙拉嗪组结肠组织病理评分低于模型组(P<0.01)。3.模型组大鼠血清中TNF-α、IL-6含量明显高于正常组(P<0.01),而血清中IL-2含量低于正常组(P<0.05);清肠栓组和美沙拉嗪组血清中TNF-α、IL-6含量较模型组均明显下降(P<0.01);清肠栓组血清中IL-2含量高于模型组(P<0.05);美沙拉嗪组血清中IL-2、IL-10含量明显高于模型组(P<0.01),且较清肠栓组增高(P<0.05)。4.模型组大鼠结肠组织中TNF-a的m RNA含量明显高于正常组(P<0.01),清肠栓组和美沙拉嗪组较模型组均明显下降(P<0.01)。5.模型组大鼠结肠组织固有层中TH17含量明显高于正常组(P<0.01),清肠栓组和美沙拉嗪组较模型组均有下降(P<0.05)。模型组大鼠结肠组织固有层中Tregs含量与正常组相较无统计学意义(P>0.05)。经治疗后,两给药组中Tregs含量增高(P<0.05),其中美沙拉嗪组增高较清肠栓组更为明显(P<0.05)。结论:1.5%DSS诱导成功复制大鼠溃疡性结肠炎模型。清肠栓能改善溃疡性结肠炎大鼠的稀便、便血情况,减轻结肠组织病理损伤,有效抑制促炎因子IL-6、TNF-α的表达,增加抑炎因子IL-2、IL-10的释放,达到缓解病情的作用。2.清肠栓能降低细胞因子IL-6的含量和结肠组织中Th17的表达,并升高细胞因子IL-10的含量和结肠组织中Tregs的表达,使得Th17/Treg平衡向Tregs侧偏移。
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