端粒酶逆转录酶对缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的影响

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目的:探讨端粒酶逆转录酶对缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法:利用腺病毒将端粒酶催化亚基转染至鼠心肌细胞,利用慢病毒介导小干扰核糖核酸(siRNA)沉默心肌细胞TERT基因,用7-ADD/Annexin V-APC双染,流式细胞仪检测细胞凋亡,ELASA检测端粒酶的活性,REAL-TIME PCR检测原心肌细胞TERT、CytC、p21的miRNA表达,Western Blot检测转染后心肌细胞TERT、CytC、p21蛋白表达的变化。结果:TERT基因和P21基因的表达在TERT过表达组最高,TERT沉默表达组最低,而CytC基因的表达在TERT过表达组最低,TERT沉默表达组最高。同时TERT过表达组心肌细胞的凋亡率明显低于TERT沉默表达组心肌细胞,而正常大鼠心肌细胞组心肌细胞的凋亡率介于两者之间。结论:TERT能增强心肌细胞端粒酶活性,外源性TERT的转染可促进心肌细胞TERT的表达,并增强端粒酶活性,抑制缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡,其机制可能与对p21及CytC基因表达的调控有关。
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