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新疆雪莲(Saussurea involucrata Kar.et Kir.)是菊科(Compositae)(Trib.CnareaeLess.)凤毛菊属(Saussurea DC)多年生高山草本植物，也是珍稀名贵药材。新疆雪莲繁殖采用人工种植的方法，由于种子自然萌发率低，故繁殖率较小；利用组织培养快速繁殖技术，缩短了繁殖周期，但是试管苗移栽成活率不高。本论文旨在对新疆雪莲原生质体分离、纯化及培养的研究来填补新疆雪莲原生质体育种的空白，为提高新疆雪莲繁殖率以及品种改良奠定基础。
本试验以新疆雪莲种子为材料，建立其悬浮细胞系，利用悬浮细胞分离得到原生质体，逐步探索出新疆雪莲原生质体分离、纯化及培养的方法，主要实验结果如下：
1.新疆雪莲诱导愈伤组织的培养基为：MS+2，4-D0.1mg/L+6-BA0.5mg/L或者MS+NAA1.5mg/L+6-BA0.5mg/L，前者得到胚性愈伤组织数量多，后者诱导愈伤速率快。
2.挑选黄绿色、颗粒状、质地松散的愈伤组织，继代培养2-3代一般可得到胚性愈伤组织，在MS+2，4-D0.05mg/L+6-BA0.5mg/L培养基上继代培养有利于其胚性愈伤组织的保持。
3.新疆雪莲胚性愈伤组织悬浮培养方法为：初始接种量以50g/L为宜；初始继代周期为2-3d，继代一个月后可延长至7-8d；最适培养基为不加琼脂的MS(激素同继代培养)+谷氨酰胺100mg/L+甘氨酸2mg/L+水解乳蛋白300mg/L+牛血清白蛋白500mg/L+酵母提取物100mg/L，有利于提高悬浮细胞生长速率。
4.以甘露醇作为新疆雪莲原生质体分离的渗透压调节剂，其浓度为11％比较贴近细胞内部渗透压，有利于原生质体分离。
5.新疆雪莲原生质体分离的最佳酶的浓度和组合为：纤维素酶2.0％、离析酶0.1％和果胶酶1.25％，pH5.85。酶解条件为：在黑暗条件下26℃，低速振荡(40r/min)酶解14h，获得原生质体产量最高，达到1.89×106 cells/g，活力为93.24％。
6.原生质体纯化采用蔗糖漂浮法，其浓度为21％时纯化效果最好。
7.原生质体培养方法为：采用固-液结合双层培养的方法，有利于渗透压的降低，提高植板率，形成微愈伤组织，获得再生植株。
8.原生质体培养的培养基为：KM8P+2，4-D0.1mg/L+KT0.2mg/L，形成微愈伤组织数目多，且生长状态良好。