木薯EIL基因家族的分离鉴定及参与植物免疫反应分析

来源 :海南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mdjpos01
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
木薯(Manihot esculenta Crantz)是世界上三大薯类作物(马铃薯、番薯、木薯)之一,木薯块根淀粉含量丰富,可磨木薯粉做面包食用,也是饲用作物和工业原料,是亚洲、非洲等地区大约5亿人口的主要粮食和主要热能来源。而细菌枯萎病是木薯最严重和最普遍的病害,研究木薯中抗病相关基因及应答细菌性枯萎病的分子机理至关重要。乙烯(Ethylene,ET)是作为一种内源激素,除参与生理过程外,也参与应对生物和非生物胁迫的免疫应答过程。ETHYLENE INSENSITIVE3-LIKE(EIL)基因家族是乙烯信号通路重要的正调控因子,在乙烯信号传递过程中启动抗病相关基因表达参与植物免疫应答提高植物的抗性。获得的主要结果如下:1.本实验首先克隆得到木薯中EILs基因家族的6个成员的全长片段,分别命名为MeEIL1、MeEIL2、MeEIL3、MeEIL4、MeEIL5、MeEIL6。分析在地毯草黄单胞菌(Xanthomonas axonopodis pv.manihotis,Xam)胁迫下MeEILs的表达谱筛选MeEIL2作为候选基因进行进一步研究。通过瞬时表达转木薯原生质体进行亚细胞定位分析,发现MeEILs基因全部都定位在细胞核上。2.通过生物信息学分析对MeEIL2基因的启动子区进行了顺式作用元件分析,发现含有G-box、W box和MYC等元件;通过原核表达进行诱导蛋白,探索MeEIL2蛋白诱导纯化条件,成功诱导表达并纯化了蛋白。3.通过自激活活性检测实验发现只有MeEIL5没有自激活活性,因此以候选基因MeEIL5为诱饵质粒进行酵母双杂交筛选互作蛋白,经过筛选、测序后在NCBI数据库查找筛选到的互作蛋白有:Manihot esculenta protein SULFUR DEFICIENCY-INDUCED 1-like、Manihot esculenta ketol-acid reductoisomerase,chloroplastic-like、Manihot esculenta probable polygalacturonase。4.通过在木薯中利用瞬时超表达和病毒诱导基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)的方法分析MeEILs在木薯中的作用。通过在木薯中瞬时超表达MeEIL2和MeEIL5基因发现,叶片内细菌数目、双氧水(Hydrogen peroxide,H2O2)和超氧阴离子(superoxide anion,O2-)含量积累引起一系列抗病反应,沉淀的胼胝体数目明显多于对照组,说明瞬时超表达MeEIL2和MeEIL5基因提高了木薯对Xam的抗性。在VIGS体系中,MeEIL2基因的表达被抑制时,发现叶片内细菌数目、H2O2和O2-含量明显少于对照组,沉淀的胼胝体数目少于对照组,说明沉默MeEIL2基因表达时木薯的抗病能力下降。综上所述,本研究鉴定了6个木薯MeEILs基因,通过在Xam胁迫下的表达谱分析和自激活检测分析,对其中的MeEIL2和MeEIL5基因做了进一步分析;探索MeEIL2基因的蛋白诱导纯化条件;筛选MeEIL5基因的互作蛋白;通过瞬时超表达体系和VIGS体系分析MeEILs基因在木薯免疫应答中的作用证明其能够正调控对细菌性枯萎病的抗性,为阐述木薯中抗病相关基因及应答细菌性枯萎病的分子机理提供参考依据。
其他文献
为了顺应我国教育事业的全面发展,展现化学课程学习对学生未来发展的重要价值。教育部在颁布的《普通高中化学课程标准(2017年版)》中提出了以“宏观辨识与微观探析”、“变化的观念与平衡的思想”、“证据推理与模型认知”、“科学探究与创新意识”、“科学态度与社会责任”为中心的化学学科核心素养。提高学生的化学学科核心素养,不仅可以适应教育改革的发展趋势,也能使学生充分利用所学知识解决真实情境中化学问题。因此
哥斯达黎加自2007年与中国建交至今,汉语教学在该国各地各级学校迅速发展,笔者所在的carmen lyra国际学校的小学各年级也都开设了汉语课程,本课题将以该校汉语零基础小学生的汉语语音学习为例,借助Praat软件收集、整理和分析该校小学四、五、六年级学习汉语一级元音的语音数据,并运用元音格局、中介语、学习迁移、知觉类比模型等理论,探讨哥斯达黎加汉语学习者在汉语语音学习的过程中遇到的各种问题,以及
改革开放以来,我国经济建设取得了巨大的成就,但是对环境造成严重的破坏,特别是忽视了水资源的保护。为了贯彻落实“绿水青山就是金山银山”的绿色发展理念,需要对环境进行治理与保护。水资源作为人类生存与发展不可或缺的资源,为了改善水环境的现状,我国颁布了《中华人民共和国水污染防治法》,并多次在重要会议上强调水资源的保护。因此对水污染防治开展审计不仅是环境保护审计的一个方面,而且是保护水资源的一种途径。为了
在现代公司治理中,掌握着技术创新能力和商业管理能力的人才正逐渐扮演着越来越重要的角色,建立科学、全面并且长期有效的股权激励机制在新经济时代的重要性也愈发体现出来。2019年A股股权激励公告数量出现十年来首次回落,全年A股股权激励计划总公告数为337个,较2018年、2017年有大幅缩减,总公告数量较2018年下跌17.60%,我国上市公司终止股权激励计划的数量也在逐年递增。现如今我国上市公司终止股
定向增发是指上市公司由于资金需求,向特定的投资者发行股份的形式。目前我国对于选择定向增发融资的公司硬性要求更为宽松,因此,即便是亏损的企业也能够通过增发获取资金。在目前的经济形势之下,上市公司往往出于获取资金、利益输送等目的进行定向增发。然而,我国有关定向增发的相关制度还不完善,对于中小投资者的保护力度较弱,执法也存在一些漏洞,这就造成了市场上的套利者有利可图,大股东利用监管漏洞转移公司利润的现象
薯蓣属(Dioscorea)是隶属于薯蓣科(Dioscoreaceae)的多年生藤本类植物。目前全球分布的薯蓣属植物大约有600种,它们的块茎多数具有可食性,是一种具有重要经济价值的块茎类作物。染色体核型研究可以为植物的遗传变异调控、系统发育分析以及亲缘关系鉴定提供细胞学参考资料,对种质资源的深度利用具有重要意义。同源染色体的准确识别是核型分析的关键环节。然而,由于薯蓣属植物染色体数量多、形态小,
在以创新人才培养为目标的现代教育教学理念指导下,“以学生为中心”的教学模式,已成为教育者关注的焦点。在这种模式中,教师的作用转变为引导学生开展学习,及时发现并解决学生在学习中遇到的问题。准确掌握学生的知识结构是教师发挥上述作用的前提。学生的知识结构包含群体知识结构和个体知识结构。通过认知诊断可获得学生的知识结构。目前大多数常用的认知诊断模型都能准确地诊断出个体知识结构,但无法获得准确的群体知识结构
参薯是热带与亚热带地区的重要薯类作物,具有产量高、营养价值高等特点。参薯块茎产量除了受到自身块茎发育影响,施加外界激素也会对其产量有一定促进作用。赤霉素作为重要的植物激素,可以调控块茎发育,影响块茎和零余子的产量。探究赤霉素调控参薯块茎发育的分子机制,可以为控制结薯时间和提高块茎产量提供理论依据。本研究通过对参薯组培苗施加赤霉素及多效唑处理后,探究赤霉素对参薯结薯影响;并使用转录组测序手段,分析赤
近些年来,伴随着移动互联的广泛普及,我国互联网平台产业经历了高速发展的黄金时期,集中热潮不断涌起,各领域的竞争也逐步由多头竞争向寡头竞争迈进。然而由于当前我国经营者集中的申报标准与互联网平台企业的发展特点不相适配,导致了经营者集中作为反垄断规制的一种手段在互联网平台企业的合并中出现缺位,严重制约了反垄断规制效果的发挥。与传统行业相比,互联网平台企业具有极强的网络效应,如马太效应、交叉网络外部性等;
高中生不仅仅要掌握基础知识,具备一定的知识素养,还要具备自主学习的能力、自主探究的能力、独立思考的能力、审美的能力、传承文化的能力等,培养学生的预习能力是培养这些能力的起点与关键。兴趣是驱动学生学习的重要因素,小说是深受高中生喜欢的文体。教师可以此为基点,通过小说预习,指导学生养成良好的预习习惯,提升学生阅读能力。本篇论文主要包括三个部分:第一章论述高中语文小说预习的重要性,首先从小说文体特点出发