目的：过敏性紫癜，又称为亨舒综合症(Henoch schonlein purpura,HSP)。是小儿常见的免疫相关的结缔组织疾病，主要表现为小血管炎症反应，学龄期儿童常见。病变多累及皮肤、关节、胃肠道和肾脏等多器官组织，表现为皮肤紫癜、关节疼痛、腹痛和便血及血尿和蛋白尿。其中肾脏损伤是基本表现之一，亦是影响HSP预后的重要因素。国内报道过敏性紫癜引起的肾脏损害，即紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)发生率为25%~80%，严重影响患儿的预后。HSP的发病机制至今尚未完全阐明，但多数患者发病前有着明确的诱因，比如感染或着变态反应及凝血机制异常，而且此病据研究与体液免疫或者细胞免疫异常有关，同时涉及多种细胞因子与炎性介质的参与。正常生理条件下，尿液中含有极微量的各类蛋白，包括ALB、NAG、β2-MG等，当某些疾病造成肾脏损伤时，尿中这些蛋白的量就会增加。尿微量白蛋白(ALB)，是一种高分子微量蛋白，尿微量白蛋白升高是可以提示肾小球早期受损的灵敏指标之一。白蛋白是能通过肾小球滤过膜的一种蛋白，在肾脏近曲小管重吸收，由于感染或者其他外界或自身因素导致肾小球损伤时，肾小球滤过功能受损，尿中可发现白蛋白及尿微量蛋白增加。在高血压、糖尿病等疾病所引起得肾损伤早期尿微量蛋白是增加的，并可作为疾病活动的一个指标。C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)，是人类机体一种急性期蛋白，由肝细胞合成。在体内浓度的变化与感染、炎症、损伤等密切相关，是机体非特异性炎症的标记物，推测其与白介素6、肿瘤坏死因子、单核细胞趋化蛋白等炎症因子有关，能够介导HSP小血管炎症反应。有研究报道，机体发生炎症时肝脏合成CRP增加，而炎症被控制后，其水平迅速恢复正常。并有研究显示HSP患儿急性期血清IL-10、IL-15与CRP之间存在显著相关性。血小板(PLT)只存在于哺乳动物体内，目前研究发现其是来源于骨髓造血组织的巨核细胞。在造血组织中多功能造血干细胞经过定向分化形成原始的巨核细胞，继而分化为成熟的巨核细胞。成熟的巨核细胞膜表面存在许多凹陷，伸入胞质之中，相邻的凹陷细胞膜在深部相互融合，使巨核细胞的部分细胞质与母体分开。最终这些与巨核细胞母体胞质分开的成分脱离巨核细胞，通过骨髓造血组织中的血窦进入外周血液循环成为血小板。其在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成等生理和病理过程中起着重要的作用。近来越来越多的资料显示激活的血小板可能参与到了慢性疾病组织的修复中，血小板还可以作为一种内源性炎症细胞参与免疫应答和促进炎症。实验发现HSPN患儿血小板活化率高，提示在HSP的发生发展过程中血小板活化是一个重要的环节。血小板释放生物活性物质，包括血管活性胺、血管活性酯、血小板源生长因子、细胞因子、蛋白酶、促凝物质等。血小板衍生因子(PDGF)可以促进细胞分裂、增加细胞增殖，最终导致肾小球系膜细胞增生。有实验证实经肝素治疗后HSPN患儿血清PDGF明显低于治疗前。轻型HSPN上呼吸道感染患儿血清中的CRP、 PLT水平和尿液中的mALB水平随病情转归而变化，提示三者对过敏性紫癜及紫癜性肾炎病情监测及预后判断有一定价值。目前对于HSP及HSPN的治疗主要是糖皮质激素及免疫抑制剂，已有人尝试应用肝素及抗血小板聚集药物预防和治疗紫癜性肾炎(HSPN)，但目前针对上呼吸道感染对HSPN恢复期影响的研究尚未见报道。本研究拟检测HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿血清中PLT、CRP以及尿液中的尿微量白蛋白的动态变化，探讨疾病反应的相关因子在儿童紫癜性肾炎诊断、治疗及预后中的意义，并对临床用药起到一定得指导作用。方法：1研究对象的选取本课题研究对象均确诊为HSPN合并上呼吸道感染患儿，参考中华医学会儿科学分会肾脏病学组2009年制定的紫癜性肾炎诊治循证指南(试行)(简称试行指南)，在过敏性紫癜病程6个月内，出现血尿和(或)蛋白尿。其中血尿的诊断标准为：肉眼血尿或镜下血尿；蛋白尿的诊断标准为：①1周之内3次尿常规蛋白阳性；②24h之内尿蛋白定量>150mg；③1周以内3次尿微量白蛋白高于正常值高限；满足以上任一项者诊断为蛋白尿。同时该指南指出，过敏性紫癜发病超过6个月，而且发生肾脏损伤的患儿，应争取进行肾活检，比如：以IgA系膜区沉积为主的系膜增生性肾小球肾炎，应诊断为紫癜性肾炎。尽管97%患儿在起病的6个月以内发生肾损害，但对这类肾损害发生时间相对更久的患儿诊断需慎重，以免漏诊、误诊，并且所有紫癜性肾炎恢复期合并上呼吸道感染患儿都经过正规临床治疗。2研究方案所有入选患儿均为临床诊断紫癜性肾炎明确（参考中华医学会儿科学分会肾脏病学组2009年制定的紫癜性肾炎诊治循证指南），但是症状轻微，且经过治疗血常规、尿常规和尿微量白蛋白等指标均恢复正常至少一个星期，后出现上呼吸道感染症状。上呼吸道感染治疗初期为早期，治疗两周后为中期，治疗四周后为后期。3检测方法3.1血小板的检测收集符合本研究要求的患儿血常规中的PLT临床检验数据。3.2CRP采用免疫荧光干式定量法(i-CHROMA Reader)室温下平衡反应板和检测缓冲液10分钟，吸取待测样品10μl至缓冲液管中，充分混匀5次，吸取混合液加至反应板加样孔中，室温放置3分钟，设置i-CHROMA Reader仪器，等待扫描，读取数据。3.3尿微量白蛋白采用ELISA双抗体夹心法标准品的稀释与加样、温育、用封板膜封板后置37℃温育30分钟、配液、洗涤5次、拍干、加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外、重复温育和洗涤、37℃避光显色15分钟、终止反应(此时蓝色立转黄色)、测定：以空白孔调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)，依据公式算出待测蛋白的浓度。4统计学分析数据统计应用SPSS Statistics17.0数据库，数据采用两个相关样本非参数检验(Wilcoxon检验)，Χ2检验，因为数据为非正态，统计后数据表示方法采用中位数（median,M），当P<0.05时，可以认为差异有统计学意义。结果：1mALB在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿尿液中的变化情况及与性别的关系1.1mALB在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿尿液中的变化情况mALB在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿上呼吸道感染初发时、治疗2周、治疗4周后的变化情况：尿液中mALB逐渐降低，治疗两周后(42.18mg/L (M))比初发时(67.24mg/L (M))显著下降，治疗后四周(27.38mg/L(M))比治疗两周显著下降，均有统计学意义(p<0.05)。1.2mALB表达情况与性别之间的关系从数据来看，初发时、治疗两周后及治疗4周后男女患儿尿液中mALB的异常变化率与性别之间均没有明显的相关性(p>0.05)。2CRP在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿血清中的变化情况及与性别的关系2.1CRP在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿血清中的变化情况CRP在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿上呼吸道感染初发时、治疗2周、治疗4周后变化情况：末梢血中CRP变化情况逐渐降低，治疗两周后(16.86mg/L(M))比初发时(28.33mg/L (M))显著下降，治疗后四周(6.27mg/L(M))比治疗两周显著下降，均有统计学意义(p<0.05)。2.2CRP的变化情况与性别之间的关系从数据来看，初发时、治疗两周后、治疗4周后男女患儿末梢血中CRP的异常变化率与性别之间均没有明显的相关性(p>0.05)。3PLT在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿尿液中的变化情况及与性别的关系3.1PLT在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿尿液中的变化情况PLT在HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿初发时、治疗2周、治疗4周后的变化情况：末梢血中PLT表达情况逐渐降低，治疗两周后(339.50×109/L(M))比入院时(459.00×109/L (M))显著下降，治疗后四周(287.80×109/L(M))比治疗两周显著下降，均有统计学意义（p<0.05）。3.2PLT的变化情况与性别之间的关系从数据来看，初发时、治疗两周后、治疗4周后男女患儿末梢血中PLT的异常变化率与性别之间均没有明显的相关性（p>0.05）。结论：1HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿尿液中mALB含量增加，经过治疗逐渐降低，四周后接近正常。2HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿末梢血中CRP含量增加，经过治疗后逐渐降低，四周后接近正常。3HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿末梢血中PLT含量增高，经过治疗后逐渐降低，四周后恢复正常。4在治疗四周的过程中HSPN恢复期合并上呼吸道感染患儿mALB、CRP及PLT与性别没有相关关系。5本实验结果提示，mALB、CRP及PLT可作为观测儿童HSPN恢复期合并上呼吸道感染治疗效果的观察指标。6本课题数据的变化情况表明HSPN恢复期在合并上呼吸道感染时再次出现新的肾脏损害。其可能机制是感染导致机体再次出现免疫紊乱，导致免疫复合物在肾脏沉积，造成肾脏的损害。7通过本课题数据观察显示HSPN恢复期合并上呼吸道感染造成的肾脏损害在经过四周的治疗后逐渐恢复，接近或者恢复正常。