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目的: 对主动免疫和过继转移免疫两种方法建立的C57BL/6小鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)模型进行评估和比较,并探讨频域OCT在C57BL/6小鼠EAU模型中的应用。 方法: 1.实验分组:将年龄在6-8周的健康野生型C57BL/6雌性小鼠随机分为过继免疫组16只、主动免疫组8只和阴性对照组8只。 2.建立模型:过继免疫组是将经过体外培养并用光感受器间维生素A类结合蛋白(1-20)(interphotoreceptor retinoidbinding protein,IRBP(1-20))刺激48小时后的特异性T淋巴细胞注射于小鼠腹腔而诱导。主动免疫组是将IRBP(1-20)溶液与完全弗氏佐剂等体积混匀成乳化液,均匀注射于小鼠头颈部、两侧肋腹部及尾根部的皮内,并腹腔注射百日咳毒素(PTX)500ng/只作为附加的免疫佐剂。阴性对照组皮内注射相同剂量的磷酸盐缓冲溶液(PBS)和完全弗氏佐剂,并腹腔注射500ngPTX。 3.模型评价:所有实验小鼠于免疫后每隔三天行眼前节照相及频域OCT眼底检查,比较三组小鼠眼前节临床表现和眼底OCT组织形态变化,并通过OCT半定量评分对三组小鼠进行统计学分析。分别在过继免疫组免疫后第13天、主动免疫组和阴性对照组免疫后第21天摘取小鼠眼球行石蜡切片HE染色,并收集血清测量细胞因子IFN-γ浓度水平,并对三组小鼠的组织病理学评分和IFN-γ水平进行比较和统计学分析。 结果: 1.眼前节表现:过继免疫组有3只小鼠于免疫后第13天出现较为严重的眼前节炎性改变,表现为前房积脓、出血,瞳孔窥不清,重度睫状充血及眼球突出,6只小鼠出现睫状充血等轻微炎性改变。 2.OCT表现:主动免疫组小鼠于免疫后第14天可在OCT上观察到玻璃体腔少量炎性细胞浸润,第21天可见视网膜内表面大量炎性细胞,视网膜轻度水肿增厚,该阶段OCT评分为(0.57±0.31)分;过继免疫组小鼠于免疫后第7天可在OCT上观察到玻璃体腔炎性细胞浸润,于第13天可见明显炎性改变,表现为视网膜各层结构紊乱,玻璃体内大量炎性细胞浸润、视网膜脱离、水肿及皱褶,该阶段OCT评分为(1.38±1.05)分,与主动免疫组相比,过继免疫组OCT半定量评分显著增高(P<0.01)。 3.组织病理学表现:主动免疫组小鼠组织病理学切片显示轻微炎性改变,表现为少量炎性细胞浸润,视网膜外层轻微皱褶,组织学评分为(0.43±0.31)分;过继免疫组小鼠切片可见严重的炎性改变,表现为大量炎性细胞浸润、视网膜皱褶、视网膜脱离、感光细胞层损伤伴网膜内血管炎及血管周围炎,组织学评分为(1.25±0.95)分,与主动免疫组相比炎症程度明显加重(P<0.01)。 4.三组小鼠在炎症高峰期时的OCT半定量评分与组织病理学评分呈显著正相关(r=0.88,P<0.01)。 5.血清IFN-γ含量:主动免疫组小鼠血清IFN-γ含量为(327.42±46.09)pg/ml,明显高于阴性对照组(P<0.01);过继免疫组小鼠血清IFN-γ含量为(452.50±50.90) pg/ml,与主动免疫组相比明显增高(P<0.01)。 结论: 1.利用IRBP(1-20)特异性T淋巴细胞过继转移免疫C57BL/6小鼠,可以诱导出EAU病变模型,且与主动免疫方法相比,其发病率、炎症程度均有所增高,发病时间提前,且在建模过程中可避免麻醉和过度操作引起的小鼠死亡。 2.OCT成像技术可以活体、实时、非接触地评估EAU模型病变过程中眼部的炎症变化,并且可以半定量疾病的严重程度,是一项可靠的炎症模型评价方法。 3.在C57BL/6小鼠EAU发病过程中,血清炎性细胞因子IFN-γ水平增高,且过继转移免疫方法较主动免疫方法诱导的小鼠炎性因子浓度水平更高。 4.过继转移免疫方法可使C57BL/6小鼠在后葡萄膜炎的基础上出现较为严重的眼前节炎症反应而发展成为全葡萄膜炎。