论文部分内容阅读
研究背景:肝门部胆管癌,又称Klatskin瘤,是指累及肝总管、左右肝管及其汇合部的胆管黏膜上皮癌。作为胆管癌最常见的一种亚型,约占胆管癌的50%～60%。其病因较为复杂,一些研究认为,肝硬化、乙肝、丙肝是其发生的危险因素,但作用机制尚未明确。原发性硬化性胆管炎患者胆管癌发病率高达15%,被认为是胆管癌的癌前病变。由于Klatskin瘤紧邻门静脉及肝动脉,导致其极易浸润周围血管;同时,Klatskin瘤又可沿胆管壁向肝内转移。目前,根治性手术为Klatskin瘤治疗的首选方案。但并非所有患者均可在手术中获益。对于发现较晚的患者,因失去最佳手术时机,仅可行姑息性治疗。结肠癌转移相关基因1(MACC1)是一种新发现的与肿瘤转移相关的基因。其蛋白是HGF/C-Met信号传导通路的连接蛋白,起着重要的桥梁作用。MACC1通过调控信号传导通路,诱导细胞增殖、分化、迁移,与肿瘤的转移密切相关。近年来,国内外学者对结直肠癌、胃癌、卵巢癌、肝细胞癌等众多实体瘤的研究表明,MACC1的高表达与肿瘤高转移率和预后不良相关。目前,鲜有对MACC1的表达与Klatskin瘤临床病理特征及预后关系的相关性研究。本研究通过免疫组化方法及荧光定量PCR的方法,检测MACC1在Klatskin瘤中的表达,并进一步分析MACC1的表达与Klatskin瘤的病理特征和预后的关系。方法:收集Klatskin瘤患者术后病理切片,所有标本经石蜡包埋后,进行免疫组化检测肿瘤组织和相应癌旁正常组织中MACC1蛋白的表达情况。另行术中采样,取手术切除的Klatskin瘤组织和正常胆管组织(胆管囊肿行手术治疗患者的胆管组织标本,且不合并胆管炎、胆管癌),经液氮处理保存在-80℃的环境中,进行实时荧光定量PCR检测Klatskin肿瘤组织、癌旁组织和正常胆管组织中MACC1mRNA的表达。分析MACC1的表达与临床病理特征及预后的关系。使用统计软件——SPSS22.0(statistical package for social sciences)分析 MACC1 在Klatskin肿瘤组织和癌旁正常组织中表达情况,及其与患者性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、肿瘤复发等临床病理参数间的关系,并分析MACC1表达与Klatskin瘤患者预后的关系。结果:1.免疫组化检测显示,Klatskin瘤组织中,MACC1蛋白表达的阳性率为54.3%(25/46),高于癌旁组织的10.9%(5/46,p<0.05)。实时荧光定量PCR结果显示,MACC1mRNA在Klatskin瘤组织中的表达水平约是正常胆管组织的10倍,是癌旁组织的5倍,癌旁组织中MACC1mRNA的表达是正常组织的2倍,差异均有统计学意义(p<0.05);2.Klatskin瘤组织中MACC1的表达与肿瘤大小、复发、淋巴结转移密切相关(P<0.05),而与患者性别、年龄、分化程度无关(P>0.05);3.生存分析表明,MACC1阳性表达的Klatskin瘤患者的平均生存时间为26.92±20.12个月,MACC1阴性表达的Klatskin瘤患者的平均生存时间为36.14士25.89个月,MACC1阳性表达的Klatskin瘤患者的生存时间明显少于MACC1阴性表达的Klatskin瘤患者(p<0.05)。结论:1.MACC1在Klatskin瘤中呈现高表达;2.MACC1的表达与Klatskin瘤肿瘤大小、复发、淋巴结转移有相关性;3.MACC1的表达影响Klatskin瘤患者预后。