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我国是人口大国,随着近年来经济腾飞带来的物质生活水平提高,人们对乳产品尤其是牛奶的需求量越来越大。然而我国优质牧草资源匮乏,无法满足畜牧生产的要求,所以为了提高奶牛泌乳期间的营养水平,通常在日粮中添加碳水化合物含量高的精料。高精料日粮容易导致亚急性瘤胃酸中毒(SARA)的产生,并继发一系列营养代谢性疾病。SARA条件下,瘤胃内环境发生改变,部分瘤胃微生物尤其是革兰氏阴性菌崩解产生脂多糖、肽聚糖等异常代谢产物,被吸收入血经门静脉进入肝脏。NOD样受体是机体天然免疫的重要组成部分,肽聚糖的分解产物可以被肝脏组织中NOD样受体特异性结合,激活相应的信号通路,诱导炎性反应的发生。本试验选用12头泌乳中期的荷斯坦奶牛,采用pH值测量、实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白印迹法(Western Blot)等方法,研究高精料日粮条件对反刍动物肝脏中NOD样受体表达的影响。此外,还选用18头泌乳中期的奶山羊,在高精料日粮中添加缓冲剂,研究综合调控对SARA的缓解作用以及NOD样受体表达情况的变化。本试验主要分为两个部分:试验一:选用了 12头处于泌乳中期的的奶牛,随机分为两组,分别饲喂高精料(High concentrate,HC)日粮(精粗比 6:4)和低精料(Low concentrate,LC)日粮(精粗比4:6)来研究高精料日粮条件下,反刍动物瘤胃中肽聚糖的分解产物DAP和MDP对肝脏NOD样受体信号通路的影响。奶牛在饲喂后0-12h通过瘤胃瘘管采取瘤胃液,用pH计测量瘤胃液的pH值。饲喂20周后屠宰,采取肝脏组织样品。利用实时荧光定量PCR(qPCR)对肝脏组织中的转录因子NF-κ B进行测量,并检测IL-1 β、IL-6、TNF-α等炎性因子以及NOD1、NOD2受体的基因相对表达量。采用蛋白印迹法(Western Blot)检测奶牛肝脏组织中NF-κ B的p65蛋白和p-p65蛋白的表达量。比较高精料组和低精料组的差异,并分析其原因。结果:饲喂后高精料组瘤胃液的pH值显著降低,pH值小于5.6的时间更长;NF-κB的相对基因表达量高精料组高于低精料组,且差异极显著;炎性基因表达量高精料组均高于低精料组,IL-1β、IL-6差异极显著,TNF-α差异显著;NOD1受体的相对基因表达量高精料组明显高于低精料组,差异极显著;NOD2受体的相对基因表达量差异不显著;蛋白水平上,p65和p-p65的蛋白表达量高精料组均高于低精料组,p65差异极显著,p-p65差异显著。试验二:试验选用18头泌乳中期奶山羊,在高精料日粮中加入缓冲剂进行综合调控试验,探究综合调控能否降低高精料日粮对SARA的影响,以及反刍动物肝脏中的NOD样受体表达量的变化情况。将18头实验动物随机分成3组,分别饲喂低精料日粮(精粗比4:6)、高精料日粮(精粗比6:4)、高精料日粮+缓冲剂,即低精料组、高精料组和调控组。安装瘤胃瘘管恢复健康后,测量每天进食后0-10h瘤胃pH值。运用实时荧光定量PCR测量三组奶山羊肝脏中的NOD1、NOD2受体,转录因子NF-κ b以及炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α相对基因表达量;用Western Blot检测NF-κ B的p65蛋白和p-p65蛋白的相对表达量。试验结果显示,经过日粮的综合调控,SARA有所缓解,瘤胃pH值显著升高,机体炎症反应作用减弱。证明缓冲剂调控有利于奶牛健康,能够提高生产效益。