盐生肉苁蓉通便有效部位研究及其初步安全性评价

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目的:1)研究盐生肉苁蓉通便活性部位的最佳提取工艺。2)通过动物实验、微生物实验研究盐生肉苁蓉通便活性,并对其进行安全性评价,为开发肉苁蓉通便功能产品提供依据。方法:1)以半乳糖醇的含量及浸膏得率为考察指标,采用单因素考察和正交实验法优化提取工艺。2)分别采用薄层色谱法、紫外分光光度法对肉苁蓉通便有效部位进行定性定量分析。3)采用复方地芬诺酯建立小鼠便秘模型,通过小鼠小肠运动及小鼠排便实验考察盐生肉苁蓉提取物的通便作用。4)通过观察给药后小鼠粪便中大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸杆菌、双歧杆菌等四大类微生物菌群的变化考察盐生肉苁蓉提取物对小鼠肠道菌群的影响。5)根据急性毒性实验、大鼠30天喂养实验进行通便部位毒理学安全性评价。结果:1)盐生肉苁蓉通便部位的最佳提取工艺条件:乙醇浓度为40%,料液比为1∶16,提取时间为2.0 h,提取次数为三次。2)通便部位中半乳糖醇的薄层鉴别条件:展开剂为醋酸乙酯-异丙醇-水-甲酸(3:4:2:1),显色剂为3%酸性高锰酸钾溶液;甜菜碱的薄层鉴别条件:展开剂为甲醇:水:甲酸(8:2:1),显色剂为改良碘化铋钾;尿囊素的薄层鉴别条件:展开剂为乙酸乙酯:丙酮:甲酸(8:1:3),显色剂为25%对二氨基苯甲醛;以半乳糖醇为对照品,采用分光光度法测定肉苁蓉中糖醇类成分的含量为20.1%。3)盐生肉苁蓉通便部位不同浓度梯度水溶液能明显缩短小鼠的首次排便时间(P<0.01),并能增加6小时内排便粒数、粪便重量、炭末推进率(P<0.01)。4)盐生肉苁蓉通便部位能促进肠道有益菌乳酸杆菌和双歧杆增殖,抑制大肠杆菌。4)急毒实验预实验结果无法得出半数致死量LD50,故采用最大给药量法考察肉苁蓉急性毒性,其最大耐受量为盐生肉苁蓉提取物104 g/kg·bw;经大鼠30天喂养实验,肉苁蓉对大鼠体重,血液和各主要器官无明显不良反应。结论:1)盐生肉苁蓉通便有效部位的提取工艺及半乳糖醇的定性定量分析方法合理、操作简便,经济,适用于工业化大量生产。2)盐生肉苁蓉提取物能促进肠蠕动,调节肠道菌群具有润肠通便功效。3)盐生肉苁蓉作为保健品用于人体是安全无毒的。
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