目的：用肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α，TNF-α）基因转染人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞（tumor infiltratinglymphocyte，TIL），构建转基因TIL，进行体外抗肿瘤活性研究，并用于荷瘤裸鼠治疗，探讨转基因TIL对肝癌治疗的价值。 方法：用转基因技术将TNF-α基因导入人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞，构建一种新型的抗肿瘤效应细胞一转基因TIL。对转基因TIL的生物学特性进行研究。用RT-PCR检测目的基因的表达，用TNF-α试剂盒检测TNF-α分泌量，用MTT法检测转基因TIL体外抗肿瘤活性，用肝癌细胞株BEL7404注射裸鼠建立裸鼠肝癌移植瘤模型，用转基因TIL进行治疗，并用TIL进行对照。 结果：转基因TIL的增殖活性与IL-2活化的TIL相似，二者具有类似的细胞增殖曲线。转基因TIL的细胞表型也未发生改变，和TIL一样具有较高的CD₈⁺水平，达60％。转基因TIL仍维持较高的稳定性。TNF-α分泌量增高是基因转导后TIL最显著的改变，其表达量为370pg/5×10⁵cells/24小时，而未转基因TIL的TNF-α分泌量检测结果明性。对肝癌细胞株BEL7404杀伤活性早期表现为明显的效靶比和作用时间依赖性，其杀伤活性在作用的早期无明显升高。利用转基因TIL对荷瘤裸鼠模型进行治疗，转基因TIL表现出较高的抑制肿瘤作用，对肿瘤的生成率、生长速度和转移的抑制作用等方面均具有比未转基因TIL更好的 D 效果。提示转基因TIL的抗肿瘤作用可随时间的推移和作用环境 的改变而逐渐显现。原位注射转基因TIL的抗肿瘤作用较强，尽 管异位注射治疗也具有一定的作用，但效果明显低于肿瘤原位注 射治疗。 结论：本研究结果表明转基因TIL对肝癌治疗具有较好作 用，在肝癌的临床治疗应用可能具有一定的价值。