儿童口腔白色念珠菌生物学特征的研究

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根据牙列期对不同年龄阶段的儿童进行分组,研究其口腔中以白色念珠菌为代表的念珠菌群定植情况,并对获得的白色念珠菌进行基因分组;在比较三种白色念珠菌生物膜研究模型的基础上,研究不同基因分组白色念珠菌的生物膜相关生物学特性,包括形成生物膜的能力,与黏附相关的ALS基因在生物膜中的表达情况等。通过以上研究,进一步了解口腔正常微生物群的组成和演替,白色念珠菌生物膜形成过程及基本特征,从生物膜的角度,更接近自然状态的状况下,系统研究定植于儿童口腔中的白色念珠菌的生物学特征,丰富口腔微生态学理论,指导儿童口腔疾病的防治提供理论基础。 四组不同年龄阶段儿童,新生儿(无牙(牙合)),乳牙列儿童,混合牙列儿童,新生恒牙列儿童,以及对照组健康成人,采用标准颊粘膜拭子结合离心的方法取样,接种鉴定培养基CHROMagar CandidaTM,获得白色念珠菌及其他几种念珠菌在口腔中的定植情况;用PCR方法对获得的白色念珠菌进一步确认,再用PCR方法进行基因分组;比较3种不同的体外白色念珠菌生物膜研究模型,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察白色念珠菌生物膜的形成过程,XTT法研究不同基因分组白色念珠菌形成生物膜的能力;利用Trizol提取生物膜中白色念珠菌总RNA,一步法逆转录PCR(RT-PCR),检测不同基因分组白色念珠菌ALS基因家族成员ALS1 3 4,在mRNA水平上的表达差异,以及生物膜中ALS1 3 4基因表达增强的情况。 用鉴定培养基从在各组人群的口腔中共检出白色念珠菌,热带念珠菌,光滑念珠菌,以及该培养基不能鉴定的其他念珠菌;新生儿口腔中检
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