电针刺预处理对内毒素血症大鼠炎症反应和急性肾损伤的影响

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bencui
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目的:实验研究和临床实践证实,针刺干预可降低某些炎性疾病的炎症介质水平,减轻炎症反应强度。然而,电针刺激“足三里”穴和“内关”穴对内毒素性急性肾损伤大鼠的影响尚不明确,因此本实验研究电针刺激“足三里”穴和“内关”穴是否对内毒素血症大鼠的炎症反应和急性肾损伤有减轻作用。   方法:将60只成年雄性Wistar大鼠随机分为六组(每组n=10):生理盐水组(N/S组)、生理盐水+假穴位电刺激组(N/S+sham组)、生理盐水+电针刺组(N/S+electroacupuncture组)、脂多糖组(LPS组)、脂多糖+假穴位电刺激组(LPS+sham组)和脂多糖+电针刺组(LPS+electroacupuncture组)。大鼠在接受50mg/kg体质量的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后,电针刺组的大鼠和假穴位电刺激组的大鼠分别接受为时30 min的双侧“足三里”穴和“内关”穴或双侧假穴位电刺激。电刺激采用频率为2 Hz的连续波,电流强度以引起四肢轻微颤动为宜(<1mA)。大鼠在接受电针刺处理后,适应20 min。然后各脂多糖组的大鼠,接受脂多糖(5 mg/kg体质量)1 ml静脉注射来复制大鼠急性肾损伤模型;各生理盐水组的大鼠,接受等量生理盐水静脉注射作为对照。脂多糖或生理盐水注射后观察240 min,然后放血处死大鼠,并快速采集血浆和肾组织标本。通过酶联免疫吸附实验方法测定血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-10(IL-10)水平;通过Griess法检测血浆中的亚硝酸盐水平;采用Western blot法检测肾组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达;采用Trans-AM ELISA法检测核因子-κB(NF-κB)DNA结合活性;用全自动生化检测仪通过酶法检测血浆中的肌酐和尿素氮的水平;光镜下观察苏木精.伊红染色法染色后的肾组织病理学变化并进行肾小管损伤的组织病理学评分。   结果:脂多糖注射后240 min,注射脂多糖的各组(LPS、LPS+sham和LPS+electroacupuncture)其血浆细胞因子(TNF-α、IL-1β和IL-10)水平、亚硝酸盐水平、肾组织中iNOS蛋白表达和肾NF-κB DNA结合活性均显著高于注射生理盐水的各组(N/S、N/S+sham和N/S+electroacupuncture)(P<0.001)。与LPS组或LPS+sham组相比,LPS+electroacupuncture组的血浆促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β)水平显著降低(分别为P<0.001和P<0.05),抗炎细胞因子(IL-10)水平显著增高(P<0.001);血浆亚硝酸盐水平、肾组织中iNOS蛋白表达和肾NF-κBDNA结合活性显著降低(P<0.05)。LPS组和LPS+sham组之间相比较,这些炎症介质的水平均无显著差异。脂多糖静脉注射后240 min,注射脂多糖的各组其血浆肌酐、尿素氮水平和肾组织病理学评分显著高于注射生理盐水的各组(P<0.001);与LPS组或LPS+sham组比较,LPS+electroacupuncture组血浆肌酐和尿素氮水平显著降低(分别为P<0.05和P<0.001),肾组织病理学评分显著降低(P<0.001)。LPS组和LPS+sham组之间相比较,血浆肌酐和尿素氮水平及肾组织病理学评分无显著差异。注射生理盐水各组的各指标组间比较均无显著差异。   结论:(1)电针刺激“足三里”穴和“内关”穴降低内毒素血症大鼠血浆促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β)水平而增加血浆抗炎细胞因子(IL-10)水平;降低血浆中亚硝酸盐水平、肾组织中iNOS蛋白表达和肾NF-κB DNA结合活性;(2)电针刺激“足三里”穴和“内关”穴降低内毒素血症大鼠血浆肌酐和尿素氮的水平及肾组织病理学评分。这些结果提示,电针刺预处理减轻脂多糖所致的炎症反应和急性肾损伤。
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