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从杭州菜园地、嘉兴大棚甜瓜田采集不同来源根际土壤和非根际土壤共14批(每批3份),利用平板稀释法和对峙法测定细菌、枯萎病菌数量及拮抗细菌的分布,结果显示,轮作后细菌总量明显增加,枯萎病菌数量降低,细菌和真菌比值(B/F值)增加,同时土壤中细菌数量越多,拮抗细菌的比例越高,尤其以大蒜与甜瓜轮作细菌数量最多,拮抗细菌比例也最高;细菌数量以菜园土壤中最高,甜瓜根际土壤次之,非根际土壤中数量最少。从14批土壤中共分离获得840个细菌分离物,在离体条件下测定他们对甜瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp melonis)的拮抗能力,结果显示43个菌株具有拮抗性,占总检测数的5.11%,其中分离自甜瓜根际土壤和非根际土壤的拮抗菌株为17个和10个,分别占5.67%和3.33%;分离自菜园蔬菜根际的拮抗菌株16个,占6.67%。经复筛后从中获得15个拮抗性较好的菌株,平板对峙法测定拮抗指数大小,结果表明,拮抗指数在2.0以上的拮抗细菌有9个,其中大多数来自根际土壤,1.0~2.0之间的有4个,1.0以下的有2株。数据显示,土壤中细菌数量的多少与拮抗细菌的分布有一定的关系,细菌总量与拮抗细菌数成正比;菜园土中细菌数量与拮抗细菌比例高于大棚甜瓜土壤;甜瓜大棚根际土壤细菌数量与拮抗细菌比例都明显高于非根际土壤,而且根际土壤中筛选出的拮抗细菌普遍拮抗指数高,离体拮抗作用强。 选取离体拮抗作用较好的9个拮抗菌株进行拮抗稳定性和抑菌谱测定,筛选出拮抗作用较稳定且抑菌谱宽的拮抗菌株7个,各菌株的培养滤液对菌丝生长和分生孢子萌发的抑制作用测定表明,它们均表现不同程度的抑菌活性,其中菌株Hc2和Hc3的抑制作用最强,培养滤液稀释50%时能完全抑制菌丝生长;凹玻片法测定拮抗细菌培养滤液与分生孢子悬浮液混合后抑制孢子萌发率的结果表明,Ec50值越低,抑制力越强,Hc3菌株的培养滤液在5%时抑制率也达50%。 对7株拮抗细菌处理盆栽甜瓜种子后发现,Hc1,Hc2,Hc3和Jt6四个拮抗细菌表现较好的促生作用,其中菌株Hc2对芽和胚根的促生效果最好;Hc1、Hc3和Jt6则对幼苗的生长有一定的促进作用。在对甜瓜幼苗的防效试验中,4株拮抗细菌在处理后10天有很好的防效,相对防效最高可达65.4%,但是在处理后20天,防效显著降低。 16个桔抗菌株的细菌学、Biolog和分子生物学(RenPCR)鉴定表明,阴性粘抗菌株大多数属于Pseudomonas spp,是土壤中的优势菌株,部分属于Burkholderta SPP.;Biolog 鉴定相 《 性在 0.50 以上的种有 尸ae峪lviosa;Wu订d;Presinovorans;叭o删censC P v个法广人。州和 Bu啪oWM c叩acm。