第一部分建立大鼠糖尿病性白内障动物模型目的:建立大鼠糖尿病性白内障动物模型,动态观察糖尿病大鼠白内障形成时间和形成过程;从形态学角度观察晶状体细胞的变化。方法:选定SD大鼠,腹腔注射STZ 65mg/kg w,制备STZ糖尿病大鼠模型。成模后(血糖≥16.7mmol/L)所有大鼠正常饮食。试验期间利用裂隙灯显微镜,每3天观察大鼠晶状体的变化,记录其混浊程度,并拍摄彩色照片。实验结束后,腹腔注射戊巴比妥溶液深度麻醉后,腹主动脉放血处死动物,立即完整摘取眼球,制作石蜡切片,HE染色观察晶状体细胞的形态学改变。结果:1.一般状态:1.1尿量增加:模型组大鼠自注射STZ 24小时后尿量开始增多,10天后出现饮食、饮水、尿量明显增加,约为正常组的2-3倍。1.2体重减轻:自第3周起,两组体重开始出现明显差异,正常组大鼠随着时间的增加体重增长,模型组大鼠体重增长缓慢,两组之间有统计学差异(P＜0.01);1.3毛发干枯:出现毛枯、易激惹、消瘦、多发感染等症状,甚至衰竭死亡。2.晶状体改变:2.1晶状体开始混浊时间:36.63±8.77d2.2白内障初期时间:54.19±8.23d2.3白内障未成熟期:71.89±12.73d2.4白内障成熟期:89.59±11.54d3.形态学结果显示:糖尿病性白内障晶状体上皮细胞呈多层状,从形态规则、分布均匀的单层立方形变为多层长形或类圆形,细胞形态类似成纤维细胞,排列不规则,细胞间隙扩大,细胞体积缩小,胞浆色深,胞核致密、浓缩,呈深紫色;晶状体纤维细胞肿胀,破裂、崩解、液化、空泡形成。结论:1.SD大鼠作为观察糖尿病性白内障形成过程的动物模型是成功的。2.高血糖导致大鼠出现糖尿病性白内障,并使其混浊的程度加重。3.血糖增高导致晶状体代谢异常,LECs继发一系列病理改变是促使糖尿病性白内障形成机制之一。第二部分中药干预糖尿病性白内障形成的实验研究目的:观察中药干预大鼠糖尿病性白内障的形成过程并从细胞生物学水平探讨STZ诱导的大鼠糖尿病性白内障的发病机制。方法:将大鼠分为正常组、模型组、治疗组和对照组。所有大鼠正常饮食。治疗组、对照组在造模成功后分别给予芪参益气滴丸、多贝斯胶囊灌胃。试验期间观察大鼠的一般情况、利用裂隙灯显微镜,每3天观察大鼠晶状体的变化,纪录其混浊程度。实验结束后,腹腔注射戊巴比妥溶液深度麻醉后,腹主动脉放血处死动物,立即完整摘取眼球,制作石蜡切片,进行转化生长因子-β、碱性成纤维细胞生长因子的免疫组化染色。用Image Plus Pro(IPP)图像分析系统测量免疫组化显色强度,进行定量分析并采用SPSS16.0统计分析处理。结果:1.一般状态:正常组大鼠皮毛光滑、性情温顺、大便成形干燥,随着时间增加体重持续增长,血糖一直在正常范围;模型组、对照组大鼠饮食尿量明显增加、毛枯、易激惹、大便溏薄,体重缓慢增长,多只大鼠消瘦明显,甚至衰竭死亡,血糖一直持高不下;治疗组大鼠饮食尿量介于正常组和模型组之间、皮毛多光滑、性情较温顺、大便可以成形,质稠,体重较模型组稍重,体重与血糖和模型组比较无统计学意义(P＞0.05)。2.模型组白内障发生时间明显早于治疗组,两者间有显著的统计学差异P＜0.01。2.1晶状体开始混浊时间:36.63±8.77d;48.89±8.16d2.2白内障初期时间:54.19±8.23d;64.37±9.77d2.3自内障未成熟期:71.89±12.73d;81.35±12.47d2.4白内障成熟期:89.59±11.54d;96.02±14.28d3.免疫组化结果比较:正常透明晶状体上皮细胞和纤维细胞中仅有少量的TGF-β、bFGF分布,而糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞和纤维细胞中TGF-β、bFGF的阳性表达率增高,与正常组、治疗组比较有显著的统计学差异P＜0.01。结论:1.中药可以有效延缓糖尿病大鼠晶体混浊的发生时间。2.本实验为探讨糖尿病性白内障在分子方面的发病机制提供了一定的证据,并为临床上应用中药抑制TGF-β、bFGF生物活性进而抑制或延迟白内障的发生发展提供了一种理论上的可能。