【摘 要】
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目的:颈动脉(carotid artery CA)斑块是引发脑卒中的一大祸首。颈动脉内膜剥脱术是切除增厚的颈动脉内膜粥样硬化斑块,已被证明是预防由于斑块脱落引起脑卒中的有效方法。内
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目的:颈动脉(carotid artery CA)斑块是引发脑卒中的一大祸首。颈动脉内膜剥脱术是切除增厚的颈动脉内膜粥样硬化斑块,已被证明是预防由于斑块脱落引起脑卒中的有效方法。内皮细胞(endothelial cells ECs)修复和内膜增生(intimal hyperplasia IH)与内膜剥脱后的血管愈合情况密切相关,延迟性内皮修复及内膜的过度增生易导致内膜剥脱后再狭窄及血栓的形成。高良姜黄素(Curcumin Cur)是绿茶多酚的一种主要成分,已经被证实了具有抗氧化,抗增殖,抗炎的生物学效应,被广泛用于治疗多种疾病,目前Cur在内膜剥脱后内皮修复及新生IH过程中的作用还未见报道。本实验拟评估Cur在颈动脉内膜剥脱术预后中的作用及相关机制。方法:首先,体外实验,培养人脐静脉内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cells HUVECs),分为溶剂对照组和Cur处理组(10μM)两组,分别利用SRB法和划痕实验检测Cur对HUVECs存活率和迁移的影响;利用吖啶橙染色,western blot检测自噬标记蛋白LC3II和p62的水平,分析Cur对ECs自噬的影响。其次,体内试验,建立颈动脉球囊损伤模型。72只健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组,内膜损伤组,内膜损伤+低剂量Cur(25 mg/kg)组,内膜损伤+高剂量Cur(75 mg/kg)组4组,每组18只。内膜损伤后6小时鼻饲Cur,连续三天,每天给药一次。72小时后大鼠安乐死。利用HE染色,对CAs行组织形态学分析;取CAs组织,检测活性氧,丙二醛,超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化酶以及IL-1β、TNF-α和IL-6等炎症因子的水平;利用TUNEL染色检测细胞凋亡情况。结果:体外实验,与对照组相比,Cur可显著提高HUVECs的存活率,并促进HUVECs迁移;Cur显著提高HUVECs中LC3-I向LC3-II的转化,并降低了p62的蛋白水平,吖啶橙染色也显示Cur促进HUVECs内酸性区室的积累,提示HUVECs内的自噬水平升高。体内试验,Cur能显著降低损伤血管ECs的凋亡率,氧化应激,以及炎症因子水平;Cur能够有效的促进损伤血管组织中LC3-I向LC3-II的转化,并显著减低p62的水平。HE染色结果显示颈动脉损伤后一周,虽然在显微镜下发现有局部的内皮层损伤,但没有观察到明显的内膜增厚。损伤后4周,损伤节段血管可见明显的内膜增厚,血管腔狭窄,Cur可以有效地抑制血管内膜增生,且高剂量的Cur效果较低剂量的Cur强。结论:Cur可能通过促进血管内皮细胞自噬发挥保护作用,进而发挥促进内膜剥脱后内皮修复及抑制新生内膜过度增生的治疗性作用。
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