夜香树叶正丁醇提取物抗肿瘤作用及机理研究

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目的:对夜香树叶正丁醇部位分离出来的化合物进行抗肿瘤的筛选,确定其抗肿瘤的有效成分和有效成分富集部位并对其抗肿瘤作用机制进行探讨。为把夜香树叶开发为治疗肿瘤药物提供实验依据。  方法:利用硅胶柱层析法对其正丁醇部位进行分离纯化,得到不同极性的流份并重结晶进行进一步的纯化获得较纯的化合物;体外实验,采用MTT法结合光镜观察和细胞集落形成法测定夜香树叶正丁醇部位各流份和重结晶获得的化合物对宫颈癌细胞株Hela、人肝癌细胞株Bele7404、胃癌细胞株7901的生长抑制情况;采用瑞氏和吉姆萨混染法、Hoechst33258-PI染色法观察各有效流份对肿瘤细胞凋亡的影响,初步探讨其体外抗肿瘤的作用机制;体内抗肿瘤实验,建立S180小鼠实体瘤、H22小鼠实体瘤模型,观察正丁醇部位浸膏灌胃途经给药对小鼠实体瘤抑瘤的影响。  结果:本实验采用柱层析,用不同比例的氯仿甲醇对夜香树叶正丁醇部位进行梯度洗脱,分离得到11个流份,并对其中的C6、C7和C8析出晶体进行重结晶得到一个较纯的化合物;夜香树叶正丁醇部位浸膏、C6、C7对宫颈癌细胞株Hela、人肝癌细胞株BEL7404、胃癌细胞株7901肿瘤细胞均有显著的抑制作用。C8对宫颈癌细胞株Hela有较强的抑制作用;动物体内实验显示,灌胃途径给药仅高剂量组对小鼠体内肿瘤的增长有抑制作用;瑞氏和吉姆萨混染法、 PI和Hoechst33258双染色法观察显示夜香树叶正丁醇部位浸膏、C6和C7可诱导胃癌细胞株7901肿瘤细胞细胞凋亡。  结论:通过体外抗肿瘤的筛选确定夜香树叶正丁醇部位具有抗肿瘤活性的富集部位为C6、C7和C8。体内实验表明灌胃途径给药对小鼠体内肿瘤的增长的抑制作用不理想,仅高剂量组对小鼠体内肿瘤抑制率大于30%;夜香树叶正丁醇部位、C6和C7对胃癌细胞株7901肿瘤细胞有诱导凋亡的作用。目前研究工作尚未结束,需要对夜香树叶进行更进一步的研究。
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