【摘 要】
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蛋白质的分选和转运对于维持细胞稳态至关重要,并与阿尔兹海默症和肿瘤等疾病的发生发展过程密切相关。内吞对于生命活动的正常运转至关重要。存在于细胞质膜上的跨膜蛋白通过网格蛋白依赖型（Clathrin-dependent endocytosis,CDE）或者非依赖型的内吞（Clathrin-independent endocytosis,CIE）途径进入细胞,内吞后到达早期内吞体中在此进行分选,被分选到
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蛋白质的分选和转运对于维持细胞稳态至关重要,并与阿尔兹海默症和肿瘤等疾病的发生发展过程密切相关。内吞对于生命活动的正常运转至关重要。存在于细胞质膜上的跨膜蛋白通过网格蛋白依赖型（Clathrin-dependent endocytosis,CDE）或者非依赖型的内吞（Clathrin-independent endocytosis,CIE）途径进入细胞,内吞后到达早期内吞体中在此进行分选,被分选到溶酶体中进行降解,或通过循环回到细胞质膜或者逆行至反式高尔基体网状结构被重复利用。分选连接（Sorting nexin,SNX）家族蛋白能与早期内吞体结合,参与调控内吞体分选和膜转运。SNX3作为SNX-PX亚家族的成员之一,参与调控胞内蛋白质转运、内吞体成熟和转运过程。研究表明SNX3在秀丽隐杆线虫中能够独立于Rertomer复合物介导部分CIE货物蛋白的循环转运。主要组织相容性复合体Ⅰ类分子（Major histocompatibility complex class Ⅰ,MHCⅠ）是经典的CIE货物蛋白,其合成、转运及免疫调控作用对于研究基础免疫和临床治疗有重要意义,目前SNX3是否参与调控MHCI的转运过程仍不清楚。本研究以Hela细胞为研究载体,利用激光共聚焦荧光显微镜,结合免疫荧光、免疫印迹法等实验手段对SNX3是否影响MHCI的内吞后分选和转运过程进行了初步研究,首先发现SNX3主要定位在早期内吞体,细胞表面的MHCI内吞后在早期内吞体分选,部分进入循环通路,部分进入降解通路并到达溶酶体中被降解。敲低SNX3会导致细胞中的MHCI蛋白含量降低,这是否是由于分选后其降解过程受到影响导致?以及其内吞后分选转运路径是否改变?针对上述问题,生化实验研究进一步发现MHCI的降解加快导致含量降低,成像结果揭示敲低SNX3抑制MHCI经分选后进入到循环通路,并促使更多的MHCI进入到EEA1标记的早期内吞体中,进而通过抑制溶酶体的功能发现更多的MHCI进入到溶酶体降解。综上,本研究初步证明了在哺乳动物细胞中SNX3能够影响MHCI的内吞后分选转运过程,为进一步研究SNX3如何参与调控CIE途径货物蛋白的转运具体机制打下基础。
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