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光动力治疗(PDT),是指将光敏剂导入靶组织内,通过光源激发产生活性氧基团,进而特异性杀伤靶组织的疗法。目前已应用于颌面部浅表恶性肿瘤和癌前病变的治疗。但是在光动力过程中,传统光敏剂无法在肿瘤部位特异性聚集和肿瘤细胞抗凋亡基因的存在,限制了PDT的疗效。因此提高光敏剂的吸收和抑制肿瘤抗凋亡成为提高PDT疗效亟需解决的关键问题。本课题拟设计一种具有基因输送作用的纳米光敏剂载体,一方面通过将光敏剂纳米化提高肿瘤中的光敏剂浓度,另一方面通过输送Wnt-1小干扰RNA(siRNA),阻断Wnt-1信号通路,抑制其下游肿瘤生存素和上皮间充质转化(EMT)进程,促进肿瘤细胞凋亡以提高光动力疗效,实现基因干扰和光动力作用的联合抗肿瘤治疗。首先分别将聚乙二醇(PEG)和光敏剂二氢卟酚e6(Ce6)接枝到聚乙烯亚胺(PEI),组成阳离子纳米基因载体PEG-PEI-Ce6;然后通过正负电结合吸附带负电的Wnt-1siRNA形成PEG-PEI-Ce6/siWnt-1纳米复合体。并对其进行表征和功能特性测定;通过体外实验对PEG-PEI-Ce6/siWnt-1纳米复合体的细胞摄取作用及暗毒性进行评估,对其基因输送能力进行测定;进一步检测其介导的基因联合光动力治疗对口腔癌KB细胞的杀伤效应,凋亡因子Survivin及Wnt-1,EMT相关因子的表达变化;通过荷瘤小鼠体内实验研究其靶向性及其介导的基因干扰联合PDT治疗口腔癌的疗效。成功构建了PEG-PEI-Ce6纳米基因载体和PEG-PEI-Ce6/siRNA纳米复合体;PEG-PEI-Ce6/siRNA纳米复合体在生理条件下相对稳定,并具有高效的基因输送能力。PEG-PEI-Ce6/siRNA纳米复合体可以被肿瘤细胞快速且高效的摄取,并且对细胞无暗毒性。PEG-PEI-Ce6/siWnt-1通过沉默Wnt-1基因,能够抑制单纯光动力作用的抗凋亡细胞因子和EMT相关蛋白的表达;PEG-PEI-Ce6/siWnt-1介导的基因干扰联合光动力治疗,能够有效的抑制肿瘤细胞活性和提高细胞凋亡的水平;体内实验研究中,PEG-PEI-Ce6/siRNA纳米复合体可以通过EPR效应被肿瘤组织高效和特异性的摄取,并对裸鼠模型无明显毒性;PEG-PEI-Ce6/siWnt-1介导的基因干扰联合光动力治疗,能够通过沉默Wnt-1基因,抑制单纯的光动力作用下的肿瘤生存因子,增加光动力治疗的敏感性,进而抑制肿瘤组织活性和提高抗肿瘤的效果。而且不伴有全身毒副作用,具有广阔的临床应用前景。