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桑黄菌是一种大型药用真菌,具有提高免疫力和抗肿瘤功效。现代医学证明桑黄菌多糖是功效的主要成分,对桑黄菌多糖的研究已成为研究的热点之一。 本文对桑黄菌液体培养技术、桑黄菌多糖超声水提技术和桑黄菌多糖体外抑瘤效果进行研究,结论如下:
1.通过液体发酵培养,研究了不同的培养基对桑黄菌生长的影响,确定桑黄菌液体发酵的培养基为:豆饼粉0.5%、玉米粉4.0%、KH<,2>PO<,4>0.1%、MgSO<,4>.5H<,2>O0.05%。
2.以桑黄菌丝产量为指标优化发酵培养条件,得到最佳培养条件为:培养温度26℃、摇床转速130r/min、pH值6.5、接种量15%~20%、培养时间7d。在最适条件下,产量达到26.1g/L。
3.对发酵液中的多糖采用醇沉的方法得到胞外多糖,醇沉的最佳工艺为:发酵液浓缩至原体积的1/5左右,加入4倍体积的100%浓度的乙醇沉淀桑黄多糖。每升发酵液可得到胞外粗多糖0.376g,回收率为76.6%。
4.对菌丝体中的多糖采用超声水提的方法得到胞内多糖,超声水提的工艺为:将桑黄菌丝体先在60℃热水中浸泡30min,60℃水浴环境下超声提取20min,超声波发生器工作时间与停歇时间比为2s/2s。继续在90℃下常规浸提3h,提取液浓缩至原体积的1/5,用4倍体积的95%乙醇沉淀,10g干菌丝中提取胞内粗多糖0.568g,得率为5.68%。
5.用气相色谱法研究了胞外多糖其中一个含量较多组分PG-c的单糖组成,结果表明:组成PG-c的单糖有半乳糖和阿拉伯糖,还有两种未知的单糖。 6.考察了桑黄菌胞内外粗多糖对U937、95D、SGC-7901三种肿瘤细胞的抑制效果,结果表明,桑黄多糖对LJ937、95D、SGC-7901三种肿瘤细胞不但没有抑制效果,反而能促进肿瘤细胞的生长,推测桑黄菌多糖可能是通过提高机体的免疫能力来达到抑制肿瘤细胞的效果,对细胞本身没有直接的毒害作用。