【摘 要】
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【目的】建立哮喘小鼠模型,选用氯化高铁血红素(hemin)干预血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达,探讨HO-1在哮喘气道炎症中的抗炎及其对T辅助细胞(T helper cells,Th)
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【目的】建立哮喘小鼠模型,选用氯化高铁血红素(hemin)干预血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达,探讨HO-1在哮喘气道炎症中的抗炎及其对T辅助细胞(T helper cells,Th)1、Th2、Th17和调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的调节作用。【方法】用卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏、激发Balb/C小鼠制备哮喘动物模型,并经hemin诱导HO-1高表达。通过肺脏组织病理分析,血清OVA特异性IgE水平测定,肺泡灌洗液(bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中炎症细胞分类及计数以了解小鼠气道炎症变化;Western Blot和Real-time PCR分别测定肺脏和脾脏组织中HO-1基因表达和蛋白水平,肺脏组织Th1、Th2、Th17及Treg分泌的相关细胞因子和特异性转录因子基因表达水平;流式细胞术分析脾脏各CD4~+T细胞亚群。【结果】实验结果显示,经致敏、激发后(OVA组),小鼠肺脏和脾脏HO-1表达较Control组增高,hemin干预后(OVA+Hemin组),HO-1蛋白表达进一步升高;肺脏病理组织学显示,OVA组见以EOS为主的大量炎症细胞浸润,而hemin干预后能明显缓解炎症;OVA组肺组织中T-bet及IFN-γ水平降低,但GATA-3和RORγt表达及IL-4、IL-17A和IL-6分泌水平较Control组显著增高,而hemin能逆转该结果;同时OVA+Hemin组Foxp3表达和IL-10及TGF-β水平均明显高于其余两组;脾脏流式分析结果显示OVA组可见Th2,Th17增多,Th1和Treg则略降低,hemin干预后明显逆转该结果。结论:上调HO-1表达能显著拮抗EOS性气道炎症,并通过调节Th1/Th2和Th17/Treg细胞平衡,促进TGF-β和IL-10分泌,抑制哮喘气道炎症。
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