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目的建立用于临床变应原检测的纳米磁微粒化学发光法,并验证其灵敏度、准确度、特异性、重复性以及稳定性等性能；为临床应用提供一种准确、快速、同时可针对多种变应原检测且适合我国患者应用的检测方法。方法采用流行病学调查结果选择临床发病率高且病情较严重的变应原作为本次研究对象；采用信噪比的评估方式确定化学发光底物液试剂的最佳浓度、合适的免疫反应条件、合适粒径的纳米磁微粒和链霉亲和素磁微粒最佳工作浓度以及生物素化变应原最佳使用浓度以及HRP标记鼠抗人IgE最佳工作浓度；根据WHO对变态反应性疾病的分级标准选择标准曲线合适的浓度范围；根据“体外诊断试剂分析性能评估指导原则”对所建立方法的性能进行评价；并依据“体外诊断试剂临床试验技术指导原则”对此方法进行临床评估。结果1化学发光反应体系中：发光底物A液中鲁米诺浓度为0.4mg/ml、发光底物B液中过氧化氢脲浓度为0.2mg/ml。此发光反应体系对HRP的敏感性很高,可检测到HRP的最小量为0.01ng/ml。在免疫反应中,加入底物A液和B液后室温避光反应5分钟检测,但在5-30分钟内检测数值均有效。2研究课题采用二步法,且每一步最佳的免疫反应条件为37℃孵育15分钟。3纳米磁微粒选择粒径100nm用于此研究课题效果最好,链霉亲和素磁微粒的最佳工作浓度为2.5μg/ml；12种生物素化变应原分别具有最佳使用浓度；鼠抗人IgE-HRP的最佳工作浓度为0.25μg/ml。4根据临床需求研究课题选择0.35～100IU/ml范围作为标准曲线。5研究课题所建立的变应原检测方法的灵敏度、准确度、特异性、重复性以及稳定性均符合国家对体外诊断试剂的要求。6根据1202例临床试验结果,所研究方法与目前Uni-CAP结果的诊断一致率在90%以上,而且通过本次临床试验可知蒿属花粉和户尘满是我国最主要的致敏变应原。结论1建立了纳米磁微粒化学发光法,且其灵敏度、准确度、特异性、重复性及稳定性均达到了设计的要求,符合国家规定,更能满足临床需求。2通过临床试验可知所建立的纳米磁微粒化学发光法可代替昂贵的国外进口产品在国内临床应用；由于本研究完全使用国内原料,更适合中国变态反应疾病患者诊断,而且操作简单,价格低廉,反应时间快。3通过临床试验确定了蒿属花粉和户尘螨是我国变态反应患者中发病率最高的变应原。