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目的:观察吴茱萸碱是否诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡及诱导胃癌细胞凋亡可能的机制,为吴茱萸碱药理作用的进一步研究提供实验依据。 方法:体外培养人胃癌SGC-7901细胞,不同浓度吴茱萸碱或吴茱萸碱与胱天蛋白酶抑制剂(z-VAD-fmk)作用SGC-7901细胞12h、24h及36h:①MTT比色法观察吴茱萸碱对胃癌细胞增殖活性的影响。②AnnexinⅤ-FITC/PI双染细胞,利用流式细胞仪观察药物对SGC-7901细胞的凋亡影响。③Real-time PCR检测aSMase和nSMase基因的表达情况,采用β-actin为内参。④HPLC检测神经酰胺前体物质鞘磷脂含量变化情况。 结果:①MTT结果显示,吴茱萸碱可抑制SGC-7901细胞增殖;AnnexinⅤ-FITC/PI双染结果显示,吴茱萸碱可诱导SGC-7901细胞凋亡,且随剂量和时间的增加效果增强;胱天蛋白酶抑制剂能够抑制吴茱萸碱诱导SGC-7901细胞的凋亡作用,但其不能完全阻止吴茱萸碱诱导SGC-7901细胞的凋亡作用。②Real-time PCR结果显示吴茱萸碱或吴茱萸碱与胱天蛋白酶抑制剂可使SGC-7901细胞内的aSMase和nSMase基因表达增高,但吴茱萸碱与胱天蛋白酶抑制剂处理胃癌细胞后的基因表达较吴茱萸碱处理胃癌细胞低。③HPLC结果显示各处理组鞘磷脂含量减少,但胱天蛋白酶抑制剂与吴茱萸碱处理组鞘磷脂含量较吴茱萸碱处理组合量高。 结论:吴茱萸碱能直接抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡,且在加入胱天蛋白酶抑制剂后吴茱萸碱仍可诱导细胞凋亡但诱导凋亡作用减弱。初步研究结果提示可能与吴茱萸碱激活SGC-7901细胞中的aSMase和nSMase基因mRNA的表达,继而通过鞘磷脂途径诱导细胞凋亡有关。