拟南芥中BIC2抑制蓝光受体CRY2活性的分子机制研究

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光是一种丰富的自然资源,不仅能够提供植物生长所需的能量,还可以作为一种信号调控植物各种生命活动,例如植物光周期、光形态建成、气孔开闭、种子萌发等过程。植物体内的光受体蛋白(photoreceptor)介导了光信号的输入,光受体通过与不同信号通路中的蛋白相互作用,将光信号进行整合与输出,引起各种生理效应。隐花色素(Cryptochrome,CRY)是一类非常重要的蓝光受体,其内部含有一个非共价结合的生色团FAD((?)lavin (?)denine (?)inucleotide)分子负责感知蓝光信号。当FAD分子感知蓝光后会发生一系列光还原反应,促使CRY蛋白产生构象变化,引起蛋白寡聚化和磷酸化,CRY从失活态向激活态转变。激活态的隐花色素和下游CIBs、CUL4COP1-SPAs、PIFs等调节蛋白相互作用起始信号转导。但是持续性的光激活对植物生长不利,其过程需要受到调控。在模式植物拟南芥中,CRY2激活过程有一个BIC((?)lue-light (?)nhibitor of (?)ryptochromes)蛋白能够抑制其的活性,起负调控作用,但其分子机理并不清楚。本文解析了CRY2N-BIC2复合物的晶体结构,体外分子筛共洗脱实验结果表明BIC蛋白不仅能够抑制CRY2寡聚化,还能阻止CRY2与下游转录因子CIB1((?)ryptochrome-(?)nteracting (?)asic-helix-loop-helix 1)结合。进一步氧化还原电势测定中,单独的CRY2不稳定反应过程中易发生沉淀影响测定结果。CRY2(N)-BIC2复合物性质稳定,推测CRY2沉淀与其发生构象变化有关系,BIC2能够抑制CRY2在氧化还原过程中的构象变化。以上实验结果表明,BIC2通过抑制CRY2蛋白寡聚化和构象变化、影响其结合下游转录因子,进而抑制CRY2的生理活性。
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