在世界范围内,宫颈癌是女性易发癌症之一,在欠发达地区宫颈癌的发病率远远高于发达区域。分子生物学和流行病学研究证实,人类乳头瘤病毒对于上皮细胞的持续感染可以导致子宫颈罹癌或病变。目前,研究人员以发现超过100多种人乳头状瘤病毒类型,这其中,HPV16型普遍在肛门和其它生殖器官的癌变组织中,HPV16连同HPV18、HPV31、HPV33、 HPV35和其它几种易存在与肛门-生殖器癌变组织的型别,被称为“高风险”型。相比之下,主要存在于疣和其它病变组织中的人类乳头瘤病毒类型被指定为“低风险”类型。高危型HPV的持续感染,导致包括E6、E7基因在内的关键癌蛋白编码基因的过量表达,E6、E7的过表达必将编码癌蛋白与重要的细胞周期调控分子或肿瘤抑制基因p53相互作用,降解或抑制其活性,导致恶性转变。尽管HPV是DNA病毒,由于较低的临床特异性和较弱实际价值,人乳头状瘤病毒DNA检测没有被广泛接受为主要筛查手段。在本工作中,NASBA、两步法RT-PCR和一步法RT-PCR联合芯片电泳用于成HPV16E6/E7mRNA的检测；本工作的另一部分是选择p53蛋白作为宫颈癌生物标志物,基于滚环扩增和氯高铁血红素/G-四联体技术对其进行分析检测。本研究的主要内容和结论如下：第一章综述了子宫颈癌和人乳头瘤病毒之间的关系,简要介绍和比较了细胞学检测、HPV DNA检测和E6/E7mRNA检测。第二章针对三种不同的核酸扩增技术联合芯片电泳对HPV 16 E6/ E7 mRNA检测做了比较型的研究。这些研究具有高通量、高可靠性的特点,相对于传统耗时的毛细管电泳或分子信标检测方法,检测耗时大大缩短。基于核酸序列扩增技术(NASBA)、一步法RT-PCR和两步法RT-PCR的HPV筛查检测技术已经建立。相信在进一步修改和完善后,这种方法能够在肛门-生殖器癌临床诊断和预后中发挥作用。第三章p53作为一种肿瘤抑制蛋白、转录因子,在细胞生长控制、DNA修复、细胞程序性调亡过程中起着重要的作用。p53被证实与宫颈癌相关,p53蛋白和E6蛋白的结合在宫颈癌的发生核发展过程中起着重要作用。在这项工作中,我们计划设计制造一个简易、便携的芯片装置,以期实现p53蛋白的高敏感性和高选择性检测。p53蛋白在微通道中被选择性捕获,然后是借助RCA实现目标放大,再借助RCA扩增得到的G-quadruplex结构单元,催化ABTS-hemin-H2O2体系发光体系,实现信号放大,最后进行比色测定。