论文部分内容阅读
有机磷农药地亚农(Diazinon,DZN)在低浓度下能产生胚胎神经发育毒性,造成胚胎神经前体细胞发育异常,进而导致成年后人或动物的认知行为和情绪反应异常,但是其毒性作用的具体机制还有待近一步研究。本文从顶端神经前体细胞(apical progenitor cells,APs)分裂进程着手,研究DZN对APs周期性核移行(Interkinetic nuclear migration,INM)过程的影响,分析所造成的增殖分化结局,并且评估了这种作用的持续性。本文第二章通过检测三种基本的酶活性,分析DZN对脑组织的急性毒性作用及其恢复情况。对妊娠14天的小鼠间隔3小时连续三次暴露0、1、5mg/kg DZN,分别于E14、E16、E18三个时间测定母鼠血的ACh E活力,胚胎脑的AChE活力、Caspase-3活力、SOD活力。结果显示,5mg/kg DZN暴露造成E14、E16、E18母鼠血胆碱酯酶活力分别降至正常值的40.25%、60.34%、80.32%;E14、E16胚胎脑胆碱酯酶活力分别降至正常值的62.53%和79.41%,在E18天恢复接近正常值;E14、E16胚胎脑Caspase-3活性分别升高至正常值的148.64%、113.86%,在E18天恢复接近正常值;三个时间点的SOD活性均无显著性变化。本文第三章研究DZN对神经前体细胞分裂增殖的影响。对染毒妊娠小鼠腹腔单次注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2’-deoxyuridine,Brdu)以标记S期细胞,制备Brdu标记1h、3h、6h定时胚胎,进行Brdu免疫组化染色。结果显示,注射1mg/kg DZN后,1h与3h时Brdu标记核位置无明显变化,6h时Brdu标记核的位置较对照组滞后。5mg/kg DZN暴露后,1h、3h、6h时Brdu标记核的位置均较对照组滞后,即DZN减缓了APs的核移行运动。本文第四章研究DZN对神经前体细胞发育演变的影响。对染毒小鼠胚胎进行Pax6、Tbr2、Tbr1免疫组化染色,结果显示5mg/kg DZN明显减少了E14、E16、E18胚胎脑Pax6阳性细胞数,但不影响Tbr2、Tbr1阳性细胞数,说明DZN的暴露主要作用于发育早期的APs,而对较为成熟的BPs和神经元影响较小。本文的结果显示,胚胎期暴露DZN能延缓APs分裂进程,扰乱APs的增殖分化平衡,减少胚胎侧脑室壁增殖池,并且这种作用能够在急性酶活力损伤作用恢复后仍然持续较长时期。