【摘 要】
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组分的发现与确证是组分制剂研究的前提。分子对接技术与药效活性评价为赤芍萜苷组分(CSTGC_S)抗缺血缺氧损伤的代表性成分发现并验证提供有效方法。本研究采用UPLC-TOF/MS/MS定性分析CSTGC_S的化学成分,与心肌缺血关键受体蛋白进行分子对接,并以Libdockscore筛选主要活性成分;建立H9c2细胞缺氧损伤模型,以CK、LDH、SOD、MDA为评价指标,辨识能代表CSTGC_S防治心肌缺血的成分组合;进一步以细胞凋亡指数、凋亡蛋白和线粒体相关m RNA表达,验证其对缺氧细胞凋亡的抑制作用,
【机 构】
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中国药科大学中药学院;南京中医药大学药学院;黄山学院化学化工学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81573620);江苏省六大人才高峰创新团队资助项目(SWYY-CXTD-004);安徽省高校省级自然科学研究重点项目(KJ2017A394)
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组分的发现与确证是组分制剂研究的前提。分子对接技术与药效活性评价为赤芍萜苷组分(CSTGC_S)抗缺血缺氧损伤的代表性成分发现并验证提供有效方法。本研究采用UPLC-TOF/MS/MS定性分析CSTGC_S的化学成分,与心肌缺血关键受体蛋白进行分子对接,并以Libdockscore筛选主要活性成分;建立H9c2细胞缺氧损伤模型,以CK、LDH、SOD、MDA为评价指标,辨识能代表CSTGC_S防治心肌缺血的成分组合;进一步以细胞凋亡指数、凋亡蛋白和线粒体相关m RNA表达,验证其对缺氧细胞凋亡的抑制作用,最终确定CSTGC_S的代表性成分。结果显示,芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷和氧化芍药苷可与4TWT、3O4O、4KZN和1M9J等靶蛋白在空间、能量上匹配且含量较高,为CSTGC_S的主要活性成分;在调节CK、LDH、SOD、MDA和维持线粒体功能、抑制细胞凋亡方面,芍药苷+芍药内酯苷+苯甲酰芍药苷组合与CSTGC_S作用无统计学差异,确定为CSTGC_S抗缺血缺氧损伤的代表性成分,为组分整体性质及制剂研究提供依据。
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