壳聚糖改性及其对凝血性能的影响

来源 :天津工业大学 | 被引量 : 11次 | 上传用户:menghong1882
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壳聚糖由甲壳素脱乙酰后得到,是一种带正电的天然高分子多聚糖,其来源广泛,化学性质活泼,可被微生物降解,具有良好的生物相容性、抗菌性、吸附性、凝血性,在生物、医药、化工、食品、化妆品等诸多领域应用广泛。为了研究壳聚糖衍生物的止血性能,本文制备了两种壳聚糖衍生物。其一,通过还原胺法,合成了一系列具有不同取代度和不同烷基侧链的烷基化壳聚糖,其二,以精氨酸和壳聚糖为原料,MES为缓冲液,EDC和NHS为交联剂,制备了精氨酸改性的胍基化壳聚糖。针对烷基改性的壳聚糖,本文采用红外光谱、元素分析等手段对其进行表征,证明烷基链已成功接枝到壳聚糖主链,且取代度随着烷基醛与壳聚糖氨基摩尔比的升高而增加。通过MTT比色法、细胞荧光染色和小鼠背部伤口模型,研究了其细胞毒性,初步评价了其在创面的实际使用效果,结果表明烷基化壳聚糖细胞不仅无明显毒性,且能促进细胞增殖,对出血创面有一定促进愈合的作用。为探讨烷基化壳聚糖的凝血性能和凝血机理,本文采用体外凝血实验,对烷基化壳聚糖的全血凝固时间、APTT、PT和TT进行对比分析,结果发现与壳聚糖相比,烷基化壳聚糖能明显缩短体外凝血时间,且该作用与烷基链的长度和取代度有关,但不依赖于传统的内外源凝血途径发挥作用。在对血小板活化作用的相关实验中,我们发现烷基化壳聚糖对血小板内钙离子的浓度和血小板膜表面P选择素的表达没有明显的促进作用,且材料表面粘附的血小板数量与质量和壳聚糖原料相似。根据以上实验结果,本文提出了烷基化壳聚糖的促凝机制。针对胍基化壳聚糖,采用MTT比色法和细胞荧光染色对其细胞毒性进行研究,结果表明胍基化壳聚糖没有明显的细胞毒性。为研究其凝血性能,本文通过全血凝固时间和血浆凝固时间进行检测,结果表明,胍基化壳聚糖能缩短凝血时间,但其凝血能力与壳聚糖相差无几,不能明显改善壳聚糖的凝血性能,其凝血作用同样不通过传统的凝血途径发挥作用。
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